[发明专利]一种检测葡萄糖-6-磷酸异构酶的试剂盒及试剂盒的使用方法在审
| 申请号： | 201811542759.7 | 申请日： | 2018-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN109593825A | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 方朝君;金立方;郑江萍;丁佳 | 申请（专利权）人： | 浙江达美生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/533 | 分类号： | C12Q1/533;C12Q1/32 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 代芳 |
| 地址： | 312000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 葡萄糖 磷酸异构酶 防腐剂 种检测 溶剂 氯化镁 氧化型辅酶Ⅰ 检测葡萄糖 磷酸脱氢酶 三磷酸腺苷 保护剂 酶检测 稳定剂 磷酸 果糖 检测 | ||
1.一种检测葡萄糖-6-磷酸异构酶的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括试剂1和试剂2，
所述试剂1以Tris缓冲液为溶剂，每升包括0.5～5mmol三磷酸腺苷、1～10mmol氧化型辅酶Ⅰ、0.5～20g保护剂和0.5～5g防腐剂；
所述试剂2以Tris缓冲液为溶剂，每升包括1～10mmol氯化镁、50～500mmol果糖-6-磷酸、1～50KU葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、5～50g稳定剂和0.5～5g防腐剂；
所述Tris缓冲液的浓度为50～500mmol/L。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂1的pH值为7.5～9。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂2的pH值为7.5～9。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述保护剂包括聚氧乙烯十二烷基醚、聚乙二醇对异辛基苯基醚、聚乙二醇单月桂酸酯、4-壬基苯基-聚乙二醇、烷基聚烯烃基乙二醇醚和烷基聚乙烯乙二醇醚中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述防腐剂包括山梨酸钾、亚硝酸钠、叠氮钠、PC300和苯甲酸钠中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鳌合剂EDTA类、聚乙二醇、二糖类、多元醇和双甘肽的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述二糖类包括山梨醇、甘露醇、蔗糖或海藻糖。
8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述多元醇包括乙二醇、丙三醇或丙二醇。
9.权利要求1～8任一项所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括：
将样品与试剂1混合后在35～42℃下孵育3～5min，得到第一孵育物；所述样品与试剂1的体积比为(1～5):(220～260)；
将所述第一孵育物与试剂2混合后在35～42℃下孵育50～70s，得到第二孵育物；所述试剂2与样品的体积比为(50～70):(1～5)；
将所述第二孵育物在波长340nm处，读取吸光度值A1，2.5～3.5min后读取吸光度值A2，根据以下公式计算样品中葡萄糖-6-磷酸异构酶的含量；
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