[发明专利]一种广地龙或其炮制品的特征指纹图谱及其构建方法和应用

说明书

本发明的广地龙或其炮制品特征指纹图谱的构建方法包括以下步骤：(1)供试品溶液制备：将广地龙生品或其炮制品粉碎，加入NaCl溶液，超声提取，离心，取上清液，定容，过滤，得到供试品溶液；(2)对照品溶液制备：取次黄嘌呤、肌苷、尿嘧啶对照品，加NaCl溶液溶解，得到对照品溶液；(3)高效液相色谱检测，构建广地龙生品或其炮制品的特征指纹图谱。本发明采用次黄嘌呤、肌苷、尿嘧啶作为对照品溶液为主要检测指标，能有效检测洗脱过程中的杂峰，能够对广地龙生品和炮制品进行精确的计算；本发明方法操作简便、稳定、重复性好，能够对广地龙生品和炮制品进行更加完善的质量评价，可快速准确地鉴定出广地龙生品和炮制品。

技术领域

本发明涉及一种广地龙或其炮制品的特征指纹图谱及其构建方法和应用，属于中药检测技术领域。

背景技术

广地龙为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum(E.Perrier)的干燥体。具清热定惊、通络、平喘、利尿之功，用于高热神昏、惊痫抽搐、关节痹痛、肢体麻木、半身不遂、肺热喘咳、水肿尿少。

甘草制地龙的炮制方法和炮制作用在《广东省中药饮片炮制规范》2011年版第一册、《广东中药志》1994版第一卷中均有记载，但在《广东省中药材标准》及历代《中国药典》中均无相关收载。采用甘草炮制广地龙是广东岭南地区的特色炮制方法，甘草在中医处方中常作为药引，调和诸药。经过甘草炮制后，能使广地龙质地松脆、增效减燥、矫臭矫味，以便于服用。

采用甘草来炮制广地龙符合中医药理念，并被广东地区人们长期广泛应用。但是现有的用甘草炮制广地龙的工艺仍处于较为粗糙的状况，浸泡、辅料用量、干燥等工艺环节细节不明确，不利于该炮制方法的推广和应用。也没有相应的质量标准，质量难以得到有效的控制，阻碍了广地龙甘草制法的进一步发展。

广东地区特有的炮制方法为“甘草制”，1984版《广东省中药饮片炮制规范》中记载了用甘草炮制地龙的方法，工艺为：取净地龙，放人温甘草水中泡2小时，捞起，干燥，切段，筛去灰屑；每100kg净地龙，用甘草20kg(煮汤)。另有其他制法也在地方沿用，如《全国中药炮制规范》中的酒制地龙；《浙江省中药炮制规范》中酒润砂炒制地龙；《湖南省中药炮制规范》中滑石粉制地龙等。

广地龙中化学成分比较复杂，单一化学成分的含量测定难以评价其质量，而中药指纹图谱则能够较全面地反映其内在的质量。目前地龙已有高效液相等色谱指纹图谱的报道，但未见国内外有甘草炮制广地龙指纹图谱的报道。因此，运用HPLC中药指纹图谱的方法，建立广地龙炮制品及其生品的HPLC指纹图谱，对炮制品及生品的质量进行综合研究分析。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种广地龙或其炮制品的特征指纹图谱及其构建方法和应用，本发明的方法可快速准确地鉴定出广地龙生品和炮制品，该方法结果准确、精密度高。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种广地龙或其炮制品的特征指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备：将广地龙生品或其炮制品粉碎，加入NaCl溶液，超声提取，离心，取上清液，用NaCl溶液定容，过滤，得到供试品溶液；

(2)对照品溶液制备：取次黄嘌呤、肌苷、尿嘧啶对照品，加NaCl溶液溶解，得到对照品溶液；

(3)高效液相色谱检测，构建广地龙生品或其炮制品的特征指纹图谱。

作为本发明所述构建方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，NaCl溶液的浓度为0.9％，超声提取的时间为20～30min，离心转速为5000r·min^-1，离心时间为10～20min，供试品溶液中广地龙生品或其炮制品与NaCl溶液的质量体积比为1:20。