[发明专利]一种亮丙瑞林的液相合成方法

说明书

本发明是一种亮丙瑞林的液相合成方法，所述的亮丙瑞林是在液相条件下由五肽片段Pyr‑His‑Trp‑Ser‑Tyr‑OH与四肽片段D‑Leu‑Leu‑Arg‑Pro‑NHEt缩合而成。本发明方法采用首个氨基酸羧基酯化保护，合成系列片段后，避开皂化反应，直接用催化剂Fe₃O₄@silica‑α‑糜蛋白酶进行脱保护反应，高效高纯度合成羧基片段。然后羧基片段与氨基片段进行缩合得到全保护肽，裂解、纯化后得到高纯产品。本发明方法不但避免了皂化反应强碱作用对肽的影响，缩短了合成周期、避免了传统方法中苛刻的反应条件，催化剂易于回收套用，而且收率高、产品纯度好、易于纯化、成本低、反应条件温和、适合于工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种医药化合物的制备方法，特别是一种亮丙瑞林的液相合成方法，在制备过程中采用了新型催化剂。

背景技术

亮丙瑞林是一种促性腺素释放激素（GnRH）类似物，其结构序列为：Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt。其结构式如下所示：

目前合成亮丙瑞林的方法有固相法、液相法还有固液结合法。固相合成方法主要是国内的专利报道，涉及到不同的全保护肽的策略选择，然后通过不同的保护剂脱除法进行脱保护获得产品。中国公开专利文献CN102464702B采用酸稳定的树脂，和Boc保护氨基酸策略进行全保护肽的合成，用胺解法将全保护肽从树枝上胺解成乙基胺，通过保护基脱除，获得亮丙瑞林。该方法采用大量的HCl的异丙醇溶液，采用大量的溶剂，对环境污染极大，成本相对较高，不适合产业化。中国公开专利文献CN101538315B采用高位阻的HMPB树脂，拟通过位阻效应避免二酮哌嗪的产生，达到大生产的目的，但是在碱性条件下，大规模生产的时候，二酮哌嗪随着抽滤的时间延长而大量产生，导致产率下降，杂质变多，不适合产业化生产。中国公开专利文献CN1865280B采用常规的wang树脂或者CTC树脂进行固相合成，用三氟醋酸脱保护基，在全裸的肽序下进行乙胺化，生产亮丙瑞林产品。该方法存在两个问题，一个在大生产过程中根本无法避免二酮哌嗪的产生，产率会大幅度下降；同时采用无保护的多肽进行乙胺化，会产生一些杂质，不易纯化。因此该方法不适合产业化生产。中国公开专利文献CN106146622采用了酸碱不同保护基策略，在同一树脂上同时采用酸稳定和碱稳定保护基进行全合成，有效避免了二酮哌嗪的生成，但是操作极其复杂，在前期的合成过程中，对环境极不友好，不适合产业化生产。《有机化学》杂志2010年第30卷第6期837-842页报道了片段法合成亮丙瑞林的方法，该方法采用2+7片段法，虽然成功的合成了亮丙瑞林，但是采用固相和液相相结合的方法，导致产品成本偏高，液相合成中用到了氯甲酸异丁酯等有毒物质，对环境不友好。的为了解决二酮哌嗪杂质导致产率降低的问题，为了获得环境友好且符合产业化生产需要，特开发本方法进行产业化生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针现现有技术的上述缺陷，提供了一种适合放大生产、收率高、纯度好的亮丙瑞林的液相合成方法，采用了5+4的片段合成法。

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种亮丙瑞林的液相合成方法，其特点是：所述的亮丙瑞林Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt是在液相条件下由五肽片段R1-Pyr-His(R2)-Trp(R3)-Ser(R4)-Tyr(R5)-OR8在新型磁性催化剂Fe₃O₄@silica-α-糜蛋白酶作用下脱除羧基保护基R8，磁性催化剂采用电磁铁吸引与产品进行分离，然后五肽与四肽片段R6-D-Leu-Leu-Arg(R7)-Pro-NHEt在缩合剂作用下缩合、脱保护而成。

本发明所述亮丙瑞林的液相合成方法，其特征在于所述的羧基与氨基的缩合反应，通过催化剂完成反应，或者通过硫酯转移完成反应，或者通过酰氯反应完成，或者通过混合酸酐完成缩合反应，或者通过活化酯反应完成缩合反应。