[发明专利]一种测定血浆中普芦卡必利浓度的方法

权利要求书

1.一种测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于，血浆样品经预处理后经液质联用系统检测其浓度，具体方法包括如下步骤：

(1)血浆样品预处理：取血浆样品，加入同位素内标普芦卡必利-¹³CD₃和氢氧化钠溶液，加入乙酸乙酯萃取，吸取上层有机相，40℃下离心浓缩挥干，加入80％(v/v)甲醇水溶液溶解，离心后取上清液；

(2)将步骤(1)预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18，3.0×100mm，3.5μm；流动相：体积比为80∶20的甲醇与1mmol·L^-1醋酸铵水溶液等度洗脱；流速：400μL·min^-1；柱温：35℃；进样量：4μL；分析时间：5min；

(3)质谱测定：离子源为电喷雾离子化电离源ESI；离子检测方式为多反应监测；离子极性为正离子；离子源电压IS：5500V；离子源温度TEM：500℃；碰撞气CAD：10psi；气帘气CUR：25psi；离子源Gas1：60psi；离子源Gas2：65psi；碰撞室入口电压：10V；碰撞室出口电压：14V；检测对象的离子选择通道：普芦卡必利，[M+H]⁺，m/z 368.4/196.0，DP 96V，CE 40eV；同位素内标普芦卡必利-¹³CD₃，[M+H]⁺，m/z 374.4/198.0，DP 91V，CE 43eV；

(4)计算：采用内标法，以普芦卡必利和同位素内标普芦卡必利-¹³CD₃的峰面积比值代入标准曲线方程计算普芦卡必利浓度。

2.根据权利要求1所述的测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于，步骤(1)中，于10mL玻璃试管中精密加入血浆样品0.4mL，精密加入10ng·mL^-1同位素内标普芦卡必利-¹³CD₃溶液100μL，加入1mol·L^-1的氢氧化钠80μL，乙酸乙酯4mL，旋涡振荡10min，2000r·min^-1离心10min，吸取上层有机相3mL，40℃下离心浓缩挥干，加入80％(v/v)甲醇水溶液200μL复溶，旋涡1min，12000g离心5min，吸取上清液150μL进行分析。

3.根据权利要求1所述的测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于，所述的血浆为口服琥珀酸普芦卡必利后的血浆。

4.根据权利要求1所述的测定血浆中普芦卡必利浓度的方法，其特征在于，所述血浆为人或动物的血浆。