[发明专利]一种茶黄素生产用固定化多酚氧化酶的工业制备方法在审
| 申请号： | 201811557810.1 | 申请日： | 2018-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN109593736A | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 任雪音;刘剑宏;浦平南;陈仕昌;郁步霞;秦静凤;葛秋霞 | 申请（专利权）人： | 江苏德和生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N11/08;C12P17/16 |
| 代理公司： | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人： | 张军 |
| 地址： | 214400 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多酚氧化酶 茶黄素 固定化多酚氧化酶 茶黄素产品 工业制备 鲜茶叶 大规模工业化生产 咖啡因 工业生产成本 小分子物质 大孔树脂 反应条件 分离提纯 工艺操作 工艺条件 节能环保 生产过程 吸附固定 茶多酚 固定化 茶渣 废弃物 茶叶 生产 优化 | ||
1.一种茶黄素生产用固定化多酚氧化酶的工业制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.破碎处理：取鲜茶叶，利用粉碎机进行初步粉碎，再用胶体磨进一步碾磨；
b.浸提：向上述步骤中得到的茶叶粉末中加入纯水，茶叶和纯水的比例为1:2-10，控制温度保持在0-30℃，加入磷酸缓冲溶液调节pH至4-6之间，在转速为60-150r/min的条件下搅拌1-5h后得到浸提液；
c.分离提纯：利用滤布对上述浸提液进行粗滤，收集滤液，并对滤液进行超滤浓缩2-8倍，得到粗酶液；
d.固定化处理：利用大孔树脂作为载体进行固定化，将活化处理后的大孔树脂与粗酶液混合，其中大孔树脂的含量为0.05-0.5g/mL，控制pH在4-6之间，温度为25-40℃，以100-300r/min的转速在恒温水浴摇床中进行固定化处理，其中固定化处理时间为2-4h，最终得到茶黄素生产用固定化多酚氧化酶。
2.如权利要求1所述的一种茶黄素生产用固定化多酚氧化酶的工业制备方法，其特征在于：优选地，步骤b中，茶叶和纯水的比例为1:5，浸提温度为10℃以下，pH值控制在4.5-5.5之间，转速优选为80r/min，搅拌时间为3h；步骤c中，对滤液超滤浓缩5倍；步骤d中，大孔树脂的含量为0.1g/mL，pH控制在4.5-5.5之间，摇床温度为30℃，摇床转速为180r/min，固定化处理时间为3h。
3.如权利要求1或2所述的一种茶黄素生产用固定化多酚氧化酶的工业制备方法，其特征在于：步骤d中，所述大孔树脂的活化处理包括以下步骤：将大孔树脂用无水乙醇浸泡24h，待树脂充分溶胀后，用无水乙醇洗至洗出液用水稀释不出现浑浊，再用纯水洗至无醇味，抽滤、烘干，备用。
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