[发明专利]一种含MAR核心片段的动物细胞表达载体有效
| 申请号： | 201811560401.7 | 申请日： | 2014-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN109576265B | 公开（公告）日： | 2020-08-28 |
| 发明（设计）人： | 高宏海;张成海;张玉晶;朱玲巧 | 申请（专利权）人： | 三生国健药业（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/00 |
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| 地址： | 201203 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 mar 核心 片段 动物 细胞 表达 载体 | ||
1.一种分离的重组表达载体的MAR核心片段，其核苷酸碱基序列如SEQ ID NO：3所示。
2.一种重组表达载体，所述载体含权利要求1所述的MAR核心片段。
3.权利要求2所述载体，其所述MAR核心片段插入启动子的上游及聚腺苷酸化位点的下游。
4.权利要求3所述载体，所述启动子为CMV、SV40或EF-1a启动子。
5.权利要求2-4任一所述载体，所述载体为pBudCE4.1、pDR1、pcDNA3.1(+)、pDHFF或pCHO 1.0，或者上述任一载体的改造载体。
6.权利要求5所述载体，其为pBudCE4.1改造的载体，所述载体核苷酸序列如SEQ IDNO：6所示。
7.权利要求2-4任一所述载体，其中所述载体包含一个或多个编码一种或多种重组蛋白基因。
8.权利要求5所述载体，其中所述载体包含一个或多个编码一种或多种重组蛋白基因。
9.权利要求6所述载体，其中所述载体包含一个或多个编码一种或多种重组蛋白基因。
10.一种宿主细胞，其包含权利要求7-9任一所述的载体。
11.权利要求10所述的细胞，其为哺乳动物细胞，选自：中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、COS细胞、Vero细胞、SP2/0细胞、NS/0骨髓瘤细胞、人类胚肾(HEK 293)细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、Hela细胞、人类B细胞、CV-1/EBNA细胞、L细胞、3T3细胞、HEPG2细胞或PerC6细胞和MDCK细胞。
12.一种制备重组蛋白的方法，所述方法包括转录和翻译存在于上述权利要求7-9任一所述表达载体上的一个或多个编码所述重组蛋白的基因。
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