[发明专利]一种液相色谱串联质谱同时测定水产品中6种色素残留量的方法

权利要求书

1.一种同时提取水产品种6种色素的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.称取待测水产样品，加入乙腈进行提取，离心；

S2.取S1的提取液，经中性氧化铝柱净化，流出液用乙腈洗涤；

S3.取S2的提取液，经MCX，SCX，PRS柱净化，流出液依次用水、乙腈洗涤，弃去滤液，用5%氨化甲醇洗脱液洗脱，收集洗脱液；

所述6种色素为孔雀石绿、隐色孔雀石绿、甲基蓝、亮绿、结晶紫和隐色结晶紫。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1待测水产样品与乙腈的质量体积比为1：2～4 g/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1所述提取次数为2～3次，每次提取时间为25～25min。

4.一种液相色谱串联质谱同时测定水产品中6种色素残留量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.按权利要求1～3任一项所述方法对待测样品进行预处理，然后浓缩、定容、过滤后即得待测试样，空白样品基质配标；

S2.将S1中所得待测试样经过液相色谱串联质谱同时测定6种色素的残留量，以保留和离子碎片丰度比时间定性，定量离子峰面积外标法定量；

所述液相色谱条件：色谱柱：XBridge-BEH C18；进样量：2μL；流速：0.4mL/min；梯度洗脱，洗脱液A为含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵溶液，洗脱液B为乙腈溶液，洗脱程序为：起始比例A相为90%，B相为10%，维持1.2min；1.2～3.5min，A相降至10%，B相升至90%，维持至4.5min；4.5～4.51min，A相降至0%，B相升至100%，维持至5.5min；6.5～6.5min，A相升至90%，B相降至10%，维持至7min；

质谱条件：电喷雾离子源，正离子扫描（ESI+）；扫描方式：多反应监测（MRM）；离子源温度：150℃；脱溶剂温度450℃；脱溶剂气流量：1000L/hr；锥孔气流量：20 L/hr；毛细管电压0.5 kV；

所述6种色素为孔雀石绿、隐色孔雀石绿、甲基蓝、亮绿、结晶紫和隐色结晶紫。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，S1所述空白样品基质配标为称取不含孔雀石绿、隐色孔雀石绿、甲基蓝、亮绿、结晶紫和隐色结晶紫的阴性水产品，按照待测样品的提取方法提取得到提取液，将提取液与标准品溶液混合而成，用高效液相色谱串联质谱法测定6种色素与空白样品基质混合标准工作溶液中各色素组分的提取离子峰面积，以浓度为横坐标，以提取离子峰面积为纵坐标，绘制出6种色素的标准工作曲线。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为2.1mm×100mm，2.5μm。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述液相色谱串联质谱为液相色谱串联三重四级杆质谱。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水产品为养殖型淡水鱼。