[发明专利]一种氨基残留物检测的通用中间体以及免疫层析检测方法在审

专利信息
申请号: 201811563577.8 申请日: 2018-12-20
公开(公告)号: CN109633149A 公开(公告)日: 2019-04-16
发明(设计)人: 张勋 申请(专利权)人: 江苏美正生物科技有限公司
主分类号: G01N33/558 分类号: G01N33/558
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 楼高潮
地址: 214135 江苏省无锡市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 氨基 金纳米粒子 乙醛酸 免疫层析检测 通用中间体 生物素 修饰 残留物检测 待检测物 抗体修饰 质控抗体 目标物检测 生物素标记 生物素修饰 放大效应 间接检测 制备生物 夹心法 竞争法 灵敏度 亲和素 试纸条 检测 孵育 羧基 制备 组装
【权利要求书】:

1.一种氨基残留物检测的通用中间体,其特征在于,所述通用中间体为生物素标记的乙醛酸,所述生物素连接在乙醛酸的羧基上。

2.根据权利要求1所述的一种氨基残留物检测的通用中间体,其特征在于,所述生物素为氨基聚乙二醇生物素,生物素通过氨基与乙醛酸的羧基相连接。

3.根据权利要求1所述的一种氨基残留物检测的通用中间体,其特征在于,所述氨基残留物包括金刚烷胺、磺胺类、克仑特罗、或抗生类,所述磺胺类包括磺胺甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉,所述抗生类包括庆大霉素、卡那霉素、安普霉素、链霉素、氟苯尼考胺或新霉素。

4.一种氨基残留物的免疫层析检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)乙醛酸上的羧基与生物素进行连接,制得生物素修饰的乙醛酸;

(2)分别制备氨基残留物抗体修饰的金纳米粒子和质控抗体修饰的金纳米粒子,并按照比例混合好分装于96孔板的微孔中;

(3)将生物素修饰的乙醛酸加入含有氨基残留物的组织样本中并与氨基残留物发生化学交联,通过水性缓冲液震荡离心提取交联有氨基残留物的衍生物,或者有机溶剂提取后氮吹后复溶得到待检测液,然后取100μL将其与步骤(2)制得的混合物在37℃的条件下孵育,孵育完成后插入试纸条进行检测;

(4)以底板、样品垫、层析膜、吸水垫和外壳构建成免疫层析试纸条,层析膜上设有检测线和质控线,检测线上固定有链霉亲和素,质控线上固定有识别质控抗体的二抗,所述层析膜、底板和外壳均没有荧光特性;

(5)将试纸条插入微孔中进行免疫层析,当混合待检测物流经检测线和质控线后,检测线和质控线的位置将会出现指示信号,根据检测线的信号强度,实现目标物的定量检测。

5.根据权利要求4所述的一种氨基残留物的免疫层析检测方法,其特征在于,所述质控抗体为与残留物抗体不产生交叉反应且不同种属的抗体。

6.根据权利要求4所述的一种氨基残留物的免疫层析检测方法,其特征在于,所述金纳米粒子的粒径为15-25nm。

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