[发明专利]一种食品中有机磷的检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种食品中有机磷的检测试剂盒及其检测方法，该检测试剂盒包括第一试剂和第二试剂，第一试剂包括以下组分：缓冲液、氯金酸、还原剂和pH调节剂，第二试剂包括以下组分：酶液、显色剂和底物；该检测方法包括以下步骤：样品的前处理；样品的定性检测；标准曲线的制作；样品的定量检测；本发明通过定性检测测出含有有机磷的样品继续进行定量检测，这样可以提高样品的检测效率，节约时间成本；利用分光光度法测定样品中有机磷的含量，在满足检测结果准确度的前体下，降低了成本，未使用毒性较强的有机溶剂，保护了环境，并为实验人员提供一个安全的实验场所，操作简单，用时短，效率高。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，具体是一种食品中有机磷的检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

目前农副产品在生产过程中，为了提高产量，农户会大量使用化肥和农药来防治病害虫，有机磷农药因其具有广谱、高效、价格低廉等特点，已成为当前世界农药三大支柱之一，其中，硫代磷酸酯类是有机磷农药中较为常用的一类，乐果、甲拌磷、马拉硫磷等毒性较强、杀虫效果好的农药都属于此类，在保证农业稳产、高产方面发挥着重要作用。然而，由于使用者缺乏科学使用农药的知识，片面追求产量，造成市场上流通的农副产品都不同程度的存在农药残留问题，成为威胁人们生命健康的隐患，使得农副产品中残留大量的农药，造成农副产品的污染，当人们食用时，对人的健康造成严重的影响。为了保证人们的生活水平，在农副产品进入市场前，需要对其中所含的有机磷进行检测，确保其符合卫生食用标准。

由于有机磷农药的活性成分大多是小分子有机化合物，故多使用气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)和高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)及多级质谱联用技术，其中研究应用最多的是GC-MS，适用于大部分农药残留检测，上述这些仪器虽然具有定量准确、灵敏度高等优点，但技术要求高，检测周期长，在现场快速检测和大批量样品筛选中具有局限性，难以满足预防和控制突发事件，并且上述仪器价格昂贵，成本高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种食品中有机磷的检测试剂盒及其检测方法，以解决现有技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种食品中有机磷的检测试剂盒，该检测试剂盒包括第一试剂和第二试剂，第一试剂包括以下组分：缓冲液、氯金酸、还原剂和pH调节剂，第二试剂包括以下组分：酶液、显色剂和底物。

作为优化，缓冲液为乙酸-乙酸钠缓冲液、磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、寡聚糖-醋酸盐缓冲液或磷酸盐-柠檬酸缓冲液中的任意一种，缓冲液的pH值为8-9。

作为优化，还原剂为连二亚硫酸钠、柠檬酸三钠、硼氢化钠、抗环血酸或辛酸亚锡中的任意一种，还原剂的浓度为1-10g/L。

作为优化，酶液为乙酰胆碱酯酶，酶液的浓度为0.3-1μg/ml，底物为硫代乙酰胆碱，底物的浓度为5-8mg/ml，pH调节剂为硫酸或氢氧化钠水溶液，硫酸水溶液的质量分数为5-10%，氢氧化钠水溶液的质量分数为10-20%。

作为优化，显色剂由8-16g二硫代二硝基苯甲酸和0.8-1.6g碳酸氢钠溶解在1L缓冲溶液中配制而成。

本发明的检测原理为：还原剂可将氯金酸中的金离子还原成纳米金，纳米金分散于溶液中，溶液呈粉色、红色或酒红色，当待测样品中含有有机磷时，有机磷中的磷硫基团可以与纳米金通过金硫键相互作用，在多重金硫键的作用下，纳米金易于聚集，导致溶液颜色发生变化，利用该颜色的变化，可以实现样品中有机磷的定性检测。