[发明专利]一种黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法在审
| 申请号： | 201811564153.3 | 申请日： | 2018-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN109613088A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 聂华贵;王宇;杨植;侯俊婕;孔素珍;詹迎新;郑仙诺;丁欣慰;黄少铭 | 申请（专利权）人： | 温州大学 |
| 主分类号： | G01N27/30 | 分类号： | G01N27/30;G01N27/333;G01N27/26 |
| 代理公司： | 温州名创知识产权代理有限公司 33258 | 代理人： | 陈加利 |
| 地址： | 325000 浙江省温州市瓯海*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 铜离子 黑磷 电化学信号 磷酸酶活性 介导 检测 转换 无机焦磷酸酶 电化学响应 特异性吸附 传感技术 混合反应 检测领域 焦磷酸酶 均相溶液 灵敏检测 纳米材料 生理条件 天然底物 焦磷酸 磷酸酶 对焦 铜盐 | ||
1.一种黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于包括以下步骤：将焦磷酸、待测活性的无机焦磷酸酶混合反应，然后加入铜盐，继续反应，得到待测反应液，然后通过黑磷检测铜离子的电化学信号，得到电化学响应信号。
2.根据权利要求1所述的黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于，通过黑磷检测铜离子的电化学信号采用滴涂黑磷纳米材料的玻碳电极检测，所述滴涂黑磷纳米材料的玻碳电极通过以下过程得到：将黑磷纳米片置于超声仪中超声1-3h，然后加5-15 V电压，电解黑磷纳米片溶液15-45min，然后再置于超声仪中超声1-3h，得到黑磷溶液，取黑磷溶液滴在玻碳电极上，干燥后得到滴涂黑磷纳米材料的玻碳电极。
3.根据权利要求2所述的黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于：将所述的待测反应液滴加到滴涂黑磷纳米材料的玻碳电极表面，反应至少4h，然后洗去反应液，吹干，置于含有KNO3的缓冲液中测方波伏安法，电势窗口选择为-0.3V-0.2 V，电位跃为4 mV，振幅为25 mV，频率为25 Hz。
4.根据权利要求1-3任一项所述的黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于所述待测反应液反应的过程如下：混合10 μL 2 mM焦磷酸和50 μL无机焦磷酸酶，再加入86 μL缓冲液，至少反应30min，然后加入铜盐，反应至少5 min。
5.根据权利要求4所述的黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于：反应在25 ℃下进行。
6.根据权利要求4所述的黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于：所述缓冲液为HEPES buffer。
7.根据权利要求4所述的黑磷介导铜离子聚集的电化学信号转换的磷酸酶活性检测方法，其特征在于：所述铜盐为硫酸铜。
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