[发明专利]一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法及其应用

说明书

本发明公开了一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法及其应用，包括步骤：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、超高相液相色谱测定、特征图谱的建立、相似度评价等。本发明建立了木蝴蝶配方颗粒的UPLC特征图谱，并通过液质联用技术对木蝴蝶配方颗粒6种共有成分进行了快速定性及定量分析。该方法为木蝴蝶配方颗粒的质量评价和控制提供了较为全面、系统、有效的快速评价方法。

技术领域

本发明属于药物分析及药物质量控制技术领域，具体涉及一种木蝴蝶配方颗粒特征图谱的构建方法及其应用。

背景技术

木蝴蝶(Oroxyli semen)为紫葳科木蝴蝶属木蝴蝶Oroxylumindicum(L)Vent.的干燥成熟种子，又名千层纸、玉蝴蝶等，始载于《滇南本草》，具有几百年的药用历史。中医理论认为木蝴蝶性味苦、甘、凉，入肺、肝、胃经，有清肺利咽、疏肝和胃之功效，用于肺热咳嗽，喉痹，喑哑，肝胃气痛，常用于以咳嗽为主症的上呼吸道感染、急性支气管炎、慢性咽炎、肺炎后期等症。现代医学研究表明，木蝴蝶的主要药效成分为黄酮类物质，具有抗炎、抗氧化、抗癌、降糖、抑制病毒及肿瘤生长等多种药理作用。具有药理活性的化学成分为脂肪油、黄芩苷元-7-葡萄糖苷、黄芩苷、黄芩苷元、千层纸素A、木蝴蝶苷B、白杨素、白杨素-7-葡萄糖醛酸苷等黄酮类化合物。

木蝴蝶配方颗粒是由单味中药饮片经水提、浓缩、干燥、制粒而成，目前并没有建立有效控制木蝴蝶配方颗粒的质量的方法。随着现代分析技术的发展，特征图谱作为一种体现中药化学成分整体特征的质量评价方法正在广泛应用，因此，有必要建立了一种快速鉴别木蝴蝶配方颗粒的UPLC特征图谱方法，为有效控制和较全面评价木蝴蝶配方颗粒的质量提供依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法，该方法为木蝴蝶配方颗粒的质量评价和控制提供了较为全面、系统、有效的快速评价方法。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法，包括如下步骤：

(a)混合对照品溶液的制备：

分别精密称取白杨素、黄芩素、白杨素-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、木蝴蝶苷A、黄芩苷和木蝴蝶苷B对照品，加甲醇溶解定容至25mL，即得白杨素、黄芩素、白杨素-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、木蝴蝶苷A、黄芩苷、木蝴蝶苷B浓度分别为12.594μg/mL、69.600μg/mL、32.286μg/mL、128.256μg/mL、31.512μg/mL、60.276μg/mL的混合对照品储备液，即得；

(b)供试品溶液的制备：

取木蝴蝶配方颗粒，研细，取0.1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入60-80％乙醇50-100mL，称定重量，超声处理15-30分钟，取出，放冷，用60-80％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤膜滤过，即得；

(c)超高相液相色谱测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入超高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，其中色谱条件为：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为276nm，流速为0.28mL/min，进样体积为1μL，柱温为30℃；

(d)特征图谱的建立：

将多批木蝴蝶配方颗粒的色谱图，采用“中药色谱特征图谱相似度评价系统”进行数据匹配，建立木蝴蝶配方颗粒的特征图谱，确定具有6个共有峰，以1号峰为参照峰S，各特征峰的相对保留时间分别为：峰1：1.00、峰2：1.20、峰3：1.22、峰4：1.35、峰5：1.52、峰6：1.68，相对保留时间在规定值的±10％之内；