[发明专利]一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法

权利要求书

1.一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）采用HPLC法建立龙胆和坚龙胆的特征图谱；

（2）根据药材在HPLC特征图谱中呈现的特征峰值不同，判定其为龙胆或坚龙胆。

2.根据权利要求1所述的一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法，其特征在于：步骤（1）所述的龙胆和坚龙胆HPLC特征图谱的建立方法，包括如下步骤：

（1）参照物溶液的制备：取龙胆苦苷对照品、獐牙菜苦苷对照品、马钱苷酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、马钱苷酸各100µg的混合溶液，即得；

（2）供试品溶液的制备：取过四号筛的药材粉末约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，称定重量，加热回流15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

（3）测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得；其色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，0.1%醋酸水溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.80mL；柱温为30℃；检测波长为240nm，理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000；

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3.根据权利要求1所述的一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法，其特征在于：步骤（2）所述的龙胆药材在HPLC特征图谱中应呈现6个特征峰，其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相一致；与龙胆苦苷参照物峰相对应的峰为S峰，计算特征峰4，5，6的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10%范围之内，规定值为：1.07，2.18，2.24；与坚龙胆区别点：在HPLC特征图谱中，特征峰4与峰5之间，不出现峰高大于峰6的色谱峰。

4.根据权利要求1所述的一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法，其特征在于：步骤（2）所述的坚龙胆药材在HPLC特征图谱中呈现5个特征峰，与龙胆苦苷参照物相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间：其相对保留时间应在规定值的±10％之内，规定值为：1.07，2.14；与龙胆的区别点：在HPLC特征图谱中，峰4和峰5之间，出现峰高大于峰5的色谱峰。