[发明专利]一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法

说明书

本发明涉及一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法，属于中药成分鉴别技术领域；具体包括：（1）采用高效液相色谱法（HPLC法）建立龙胆和坚龙胆的特征图谱：取龙胆苦苷对照品、獐牙菜苦苷对照品、马钱苷酸对照品适量，精密称定，制成三者的混合溶液，得对照品参照物溶液；另取药材粉末（过四号筛）适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇，回流提取15分钟，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液；分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定；（2）根据药材在高效液相特征图谱中呈现的特征峰值不同，龙胆特征图谱中在特征峰4和5之间无明显高于特征峰6的色谱峰，坚龙胆特征图谱中特征峰4和5之间出现峰高明显高于特征峰5的色谱峰，可判定其为龙胆或坚龙胆；该方法简单、高效、快速、准确。

技术领域

本发明涉及一种中药材龙胆和坚龙胆的鉴别和区分方法，属于中药成分鉴别技术领域。

背景技术

龙胆为龙胆科植物条叶龙胆（Gentiana manshurica Kitag.）、龙胆（Gentiana scabra Bge.）、三花龙胆（Gentiana triflora PalL.）或坚龙胆（Gentiana rigescens Franch）的干燥根和根茎。具有清热燥湿，泻肝胆火的功效，用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，湿疹瘙痒，肝火目赤，耳鸣耳聋，胁痛口苦，强中，惊风抽搐。龙胆始载于东汉《神农本草经》，列为中品，历代本草均有收载。

目前，龙胆为42种保护的野生植物药材品种之一，4个基源的龙胆均是国家三级重点保护野生药材品种，属于资源严重减少的主要常用野生药材物种。目前条叶龙胆和三花龙胆产量低，栽培面积小，唯有龙胆和坚龙胆栽培面积较大，是中药材龙胆原料的主要来源。市场上家种龙胆年产量较坚龙胆少，其有效成分龙胆苦苷含量较高，南龙胆（坚龙胆）虽然种植面积大，但其龙胆苦苷含量较低，因此，龙胆市场价格要明显高于坚龙胆。近年来，一些龙胆的商品药材中时常掺入坚龙胆及一些伪品，造成龙胆质量的参差不齐，因此建立一种快速、准确、客观、简单的鉴别和区分中药材龙胆Gentiana scabra Bge.和坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的方法有重要的意义。

目前，鉴别方法包括传统方法和与现代科技结合的色谱方法。现阶段，传统的眼看、口尝、鼻闻、手摸等简便方法由于主观性强，在中药材鉴别已非常局限，而色谱方法诸如UV、IR、NIR、TLC中存在大量的假阳性和假阴性问题，容易导致结论的偏差，另外一些已存在的试图鉴别龙胆和坚龙胆的HPLC法，由于方法复杂，区别点不明确，或者样品不具备代表性，难以做到高效、快速、准确的区分。因此，本发明通过采用高效液相色谱法(HPLC法）建立龙胆的特征图谱，能快速，准确的鉴别和区分龙胆和坚龙胆药材。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药材龙胆（Gentiana scabra Bge）和坚龙胆（Gentiana rigescens Franch）的区分鉴别方法，应用高液相色谱法(HPLC法）建立龙胆的特征图谱，鉴别和区分龙胆和坚龙胆两种不同基源的中药材，简单、快速、准确。

为实现上述发明的目的，本发明采取的技术方案如下：

一种中药材龙胆和坚龙胆的区分鉴别方法，包括如下步骤：

（1）采用HPLC法建立龙胆和坚龙胆的特征图谱；

（2）根据药材在HPLC特征图谱中呈现的特征峰值不同，判定其为龙胆或坚龙胆；

步骤（1）所述的龙胆和坚龙胆HPLC特征图谱的建立方法，包括如下步骤：