[发明专利]一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法

说明书

本发明公开了一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法，本发明先建立百部药材的特征图谱，通过对比分析，确定了鉴别百部药材基源的依据，该方法简单，重现性良好，准确可靠，UPLC的线性梯度洗脱的条件简单，便于操作，可用于百部药材基源的鉴别，为临床原料的控制提供了依据。

技术领域

本发明属于药物分析及药物质量控制技术领域，具体涉及一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法。

背景技术

百部为百部科植物直立百部(StemonasessilifoliaMiq.)、蔓生百部(StemonajaponicaMiq.)或对叶百部(StemonatuberosaLour.)的干燥块根。春、秋二季采挖，除去须根，洗净，置沸水中略烫或蒸至无白心，取出，晒干。百部具有润肺下气止咳，杀虫的作用。为治疗肺痨之要药，既能抑制结核杆菌而杀痨虫，以绝其根本，又能化痰止咳，滋阴润肺，肺阴充足，化源有利，使肺恢复宣肃功能，主治百咳、久咳不止、肺结核等。据中国药典2015版收载，百部为常见多基源中药，来源于百部科植物直立百部Stemonasessilifolia(Miq.)Miq.、蔓生百部Stemona japonica(Bl.)Miq.或对叶百部StemonatuberosaLour.。查阅大量文献发现，百部因品种、产地不同，其主要化学成分的种类和含量有一定的差异。从结构类型的分布来看，对叶百部中以I型和II型生物碱为主，直立百部中II型生物碱较多，I型和IV型次之，蔓生百部中II型和IV型生物碱较多。在生物活性研究方面，I、II、III型生物碱均有止咳作用，但以I型最好。从文献研究结果，对叶百部品种较优。

目前文献研究主要集中于百部药材或饮片的化学成分研究方面，而关于百部药材基源鉴别的研究较少。因此，有必要提供一种百部药材基源鉴别的方法。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明的首要目的在于提供一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法，包括如下步骤：

(a)供试品溶液的制备：

分别取对叶百部药材和直立百部药材，研细，取0.25g，精密称定，置10ml量瓶中，加入50-100％甲醇适量，超声处理10-30分钟，取出，放冷，用50-100％甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得；

(b)参照物溶液的制备：

取绿原酸对照品适量，加80％甲醇制成每1ml含绿原酸20μg，即得；再取对叶百部对照药材、直立百部对照药材0.5g，精密称定，置20ml量瓶中，加入80％甲醇适量，超声处理30min，取出，放冷，用80％甲醇定容至刻度，摇匀，用0.22um滤膜滤过，即得；

(c)色谱条件与系统适用性试验：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B，按下表进行梯度洗脱；流速：0.25ml/min；柱温为25℃；检测波长为210nm；

(d)特征图谱的建立：

分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1μl，注入超高效液相色谱仪，测定，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”匹配，建立对叶百部药材和直立百部药材的特征图谱；

(e)鉴别依据：