[发明专利]基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法

权利要求书

1.一种基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、取有机配体与二价镍盐进行配位反应，得到金属螯合物溶液；

S2、将金属螯合物溶液涂覆在表面带负电荷的表面增强拉曼基底的表面，干燥后得到功能化基底；

S3、将与水互溶的醇与组织液混合均匀，离心，取上层清液；

S4、向S3中的上层清液中加入酸性溶液，混合均匀后加入有机溶剂，混合均匀后离心，取水相溶液；

S5、将S4中的水相溶液涂覆在S2中的功能化基底上，利用拉曼光谱仪进行检测；

其中，所述有机配体为柠檬酸、乙二胺四乙酸、氨基三乙酸、吡啶中的一种。

2.根据权利要求1所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，S1的具体步骤为：将有机配体与二价镍盐溶液混合，调节pH值为5-7，搅拌后得到金属螯合物溶液。

3.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S1中，所述二价镍盐为溶于水的二价镍盐。

4.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S1中，所述二价镍盐为六水硝酸镍、醋酸镍、氯化镍中的一种或者多种的混合物。

5.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S2中，将金属螯合物溶液滴在表面带负电荷的表面增强拉曼基底的表面，干燥后得到功能化基底；所述表面带负电荷的表面增强拉曼基底按照以下工艺进行制备：将硅片经过王水浸泡2-3h后洗净，再用食人鱼洗液浸泡处理0.5-1.5h，然后用超纯水洗净后用氮气吹干制得干净的硅片；将平均粒径为50nm的金纳米溶胶离心后滴加在干净的硅片表面，干燥后得到表面带负电荷的表面增强拉曼基底。

6.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S3中，所述组织液为血清、肌肉组织液、滑膜组织液、表皮组织液中的一种。

7.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S3中，与水互溶的醇与组织液的体积比为0.1-0.5：0.1。

8.根据权利要求7所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S3中，所述与水互溶的醇为乙醇、甲醇、正丁醇中的一种或者多种的混合物。

9.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S4中，上层清液、酸性溶液、有机溶剂的体积比为10：0.1-1：2-3。

10.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S4中，所述酸性溶液为强酸溶液、强酸弱碱盐溶液、弱酸溶液中的一种；所述有机溶剂为密度小于水且与水不互溶的有机溶剂。

11.根据权利要求10所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S4中，所述酸性溶液为盐酸、硫酸、醋酸、硝酸中的一种或者多种的混合物；所述有机溶剂为石油醚、环己烷、乙醚、甲醚中的一种或者多种的混合物。

12.根据权利要求11所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于所述有机溶剂为石油醚。

13.根据权利要求1或2所述基于金属螯合物拉曼标签技术检测组织液中组胺的方法，其特征在于，在S5中，拉曼光谱仪的激发光波长为633nm。