[发明专利]车前草药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法

权利要求书

1.一种车前草药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

参照物溶液的制备：分别以大车前苷和毛蕊花糖苷为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；向车前草对照药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液，将所述提取液滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；

供试品溶液的制备：向车前草药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液I，将所述提取液I滤过，取续滤液作为供试品溶液I；向车前草标准汤剂样品中加入提取溶剂，加热回流，得提取液II，将所述提取液II滤过，取续滤液作为供试品溶液II；

测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、供试品溶液I和供试品溶液II注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得车前草药材UPLC特征图谱；

所述超高效液相色谱的色谱条件包括：

固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

流动相：以乙腈为流动相A，以体积分数为0.05%-0.2%的磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；

所述梯度洗脱具体为：

0-5min，流动相A由体积分数为12%升高到13%，流动相B由体积分数为88%降低到87%；

5min-15min，流动相A由体积分数为13%升高到17%，流动相B由体积分数为87%降低到83%；

15min-20min，保持流动相A体积分数为17%，保持流动相B保持体积分数为83%；

20min-25min，流动相A保持由体积分数为17%升高到88%，流动相B由体积分数为83%降低到12%；

25min-26min，流动相A由体积分数为88%降低到12%，流动相B由体积分数为12%升高到88%；

26min-30min，流动相A保持体积分数为12%，流动相B保持体积分数为88%；

所述提取溶剂为体积分数为50%-80%的甲醇水溶液。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：

柱温25℃-35℃，流速为每分钟0.25mL-0.35mL，检测波长为270nm-360nm。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：

柱温30℃，流速为每分钟0.3mL，检测波长为330nm。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述提取溶剂的用量为每1g车前草药材加入50mL-100mL。

5.根据权利要求1-4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述加热回流的时间为60min-90min。