[发明专利]车前草药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法

说明书

本发明涉及一种车前草药材UPLC特征图谱构建方法和检测方法。该特征图谱构建方法步骤如下：分别以大车前苷和毛蕊花糖苷为对照品制备对照品参照物溶液；以车前草对照药材制备对照药材参照物溶液；分别取车前草药材和标准汤剂样品，加提取溶剂提取，过滤，所得滤液作为供试品溶液和标准汤剂供试品溶液；分别吸取所述参照物溶液、供试品溶液、标准汤剂供试品溶液注入超高效液相色谱仪，测定；比较车前草药材供试品图谱和标准汤剂样品供试品图谱，标定7个水溶性成分的特征峰，获得车前草药材的UPLC特征图谱。该特征图谱能用于定性、定量分析车前草药材的质量，能够确保采用该药材制备的车前草传统汤剂的质量，也适用于检测含车前草的其它制剂。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种车前草药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法。

背景技术

车前草为车前科植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressaWilld.的干燥全草。车前草最早见于《诗经·周南·芣苢》，《神农本草经》列为上品。《本草纲目》云：“幽州人谓之牛舌草，蛤蟆喜藏伏于下，故江东称为蛤蟆衣；气味甘、寒、无毒。主治气癃止痛，利水道小便，除湿痹。久服轻身耐老。男子伤中，女子淋沥不欲食，养肺强阴益精，令人有子，明目治赤痛。去风毒，肝中风热，毒风中眼，赤痛障翳，脑痛泪出，压丹石毒，去心胸烦热。养肝，治妇人难产，导小肠热，止暑湿泻痢。”现代研究其主要有效成分有黄酮类、苯乙醇苷类、环烯醚萜类、三萜及甾醇类等，而且具有一定的降血脂和血尿酸、抗癌抗衰老、止咳平喘、缓泻等作用。其具有较强的临床应用价值，市场需求广阔，被开发成中药配方颗粒及相关复方制剂广泛用于临床。

中药的临床使用多以传统汤剂为主。中药汤剂的物质基础，是中医理论指导下防治疾病的基础。现行的法定标准仅针对单一成分进行定量控制，量效关系不能全面反映中药成分的整体作用。在现阶段，中药绝大多数有效成分未明确的情况下，中药指纹图谱/特征图谱的建立能大大提高中药质量控制的技术水平及科技含量。

《中国药典》2015年版将大车前苷作为车前草质量评价指标，仅对大车前苷含量进行控制，并不能全面反映其质量，且目前文献研究报道的关于百部特征图谱的建立，均只针对药材原料，指标成分多以脂溶性成分为研究对象，主要用于中药材真伪、产地、品质差异的定性鉴别，较难全面反映车前草的质量特征，也不能反应传统中药汤剂的物质基础特征。

发明内容

基于此，本发明提供一种车前草药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法。构建的车前草药材的特征图谱具有7个水溶性成分的特征峰，可以快速、全面实现对车前草药材多个特征成分的质量监控，并能反应车前草的传统中药汤剂的物质基础特征。

具体技术方案为：

一种车前草药材UPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

参照物溶液的制备：分别以大车前苷和毛蕊花糖苷为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；向车前草对照药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液，将所述提取液滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；

供试品溶液的制备：向车前草药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液I，将所述提取液I滤过，取续滤液作为供试品溶液I；向车前草标准汤剂样品中加入提取溶剂，加热回流，得提取液II，将所述提取液II滤过，取续滤液作为供试品溶液II；

测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、供试品溶液I和供试品溶液II注入超高效液相色谱仪中测定，，标定水溶性共有峰，即得车前草药材UPLC特征图谱。

在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：

固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

流动相：以乙腈为流动相A，以体积分数为0.05％-0.2％的磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；

所述梯度洗脱具体为：