[发明专利]一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法

权利要求书

1.一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备对照试剂溶液的步骤：分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂，加乙醇制成混合对照品溶液，摇匀，即得；

制备供试品溶液的步骤：取待测中药饮片样品粉末，置锥形瓶中，加乙醇，振摇提取，滤过，取续滤液，即得；

含量测定的步骤：分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录液相色谱图；

结果判定的步骤：供试品色谱中，不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰；若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管列阵检测器比较供试品与相应对照试剂的色谱峰在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，供试品与相应对照试剂的吸收光谱相同，则可判定供试品中含有相应染色剂。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在制备对照试剂溶液的步骤中，所述对照试剂溶液的配制方法如下：分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂，加体积浓度为50％的乙醇，制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液，摇匀，即得。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在制备供试品溶液的步骤中，所述供试品溶液的提取过程如下：取待测中药饮片样品粉末2g，置锥形瓶中，加入体积浓度为50％的乙醇25ml，振摇提取5min，滤过，取续滤液，即得。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在含量测定的步骤中，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以含体积浓度为0.5％的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B，流动相A与流动相B体积之和为100％，进行梯度洗脱。

5.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱条件如下：0-25min时，流动相A的体积为2→55％，流动相B的体积为98→45％；25-35min时，流动相A的体积为55％，流动相B的体积为45％；35-37min时，流动相A的体积为55→2％，流动相B的体积为45→98％；37-40min时，流动相A的体积为2％，流动相B的体积为98％。

6.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，在含量测定的步骤中，所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器，检测波长420nm。

7.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，在含量测定的步骤中，所述液相色谱仪的柱温为20℃，流速为0.7ml/min。

8.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，在含量测定的步骤中，理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000，理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000，理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000，理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000；金胺O(1)和金胺O(2)为金胺O的同分异构体。

9.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在结果判定的步骤中，具体判定过程如下：若供试品色谱出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰，则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，若吸收光谱一致，则可判定供试品中含有金橙Ⅱ；若供试品色谱出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰，则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，若吸收光谱一致，则可判定供试品中含有金胺O；若供试品色谱出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰，则采用二极管列阵检测器比较供试品中与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与碱性橙对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，若吸收光谱一致，则可判定供试品中含有碱性橙。