[发明专利]人源化抗PD-1抗体及其用途

权利要求书

1.一种分离的PD-1抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变区或其部分和/或重链可变区或其部分，

其中轻链可变区或其部分包含氨基酸序列为SEQ ID NO:10的轻链CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO:11的轻链CDR2和氨基酸序列为SEQ ID NO:12的轻链CDR3；且

重链可变区或其部分包含氨基酸序列为SEQ ID NO:13的重链CDR1、氨基酸序列为SEQID NO:14的重链CDR2和氨基酸序列为SEQ ID NO:15的重链CDR3。

2.权利要求1的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含、由以下组成或基本上由以下组成：与PD-1抗体轻链可变区序列SEQ ID NO:23具有至少90％，92％，95％，98％或100％序列同一性的氨基酸序列，和/或与PD-1抗体重链可变区序列SEQ ID NO:22具有至少90％，92％，95％，98％或100％序列同一性的氨基酸序列。

3.权利要求1或2的分离的PD-1抗体，其中所述抗体进一步包含轻链恒定区和重链恒定区,优选地所述轻链恒定区为与氨基酸序列为SEQ ID NO:25的kappa轻链恒定区具有至少90％，92％，95％，98％或100％序列同一性的氨基酸序列，和/或所述重链恒定区为与氨基酸序列为SEQ ID NO:24的IgG4重链恒定区具有至少90％，92％，95％，98％或100％序列同一性的氨基酸序列。

4.权利要求1-3中任一项的分离的PD-1抗体，其为IgG抗体，优选为IgG4抗体。

5.权利要求1-4中任一项的分离的PD-1抗体，其为单克隆抗体。

6.权利要求1-5中任一项的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段，其与重组人PD-1蛋白的结合亲和力K_D平均值为20-200pM，优选60-70pM,更优选64.8pM。

7.权利要求1-6中任一项的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段，其与含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的PD-1蛋白分子或与SEQ ID NO:1具有至少90％，92％，95％，98％或100％序列同一性的氨基酸序列的蛋白分子特异性结合。

8.权利要求1-7中任一项的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中抗原结合片段的形式为Fv、Fab、Fab′、Fab′-SH、F(ab′)₂、Fd片段、Fd'片段、单链抗体分子或单域抗体；其中单链抗体分子优选为scFv、di-scFv、tri-scFv、双体抗体或scFab。

9.一种改构药物分子,其为权利要求1-8中任一项的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段与另一分子形成的共价或非共价连接物或形成的重组多靶点融合药物，所述另一分子选自小分子化合物和/或生物大分子。

10.一种分离的核酸，其包含、由以下组成或基本上由以下组成：编码权利要求1-8中任一项的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列，优选地，所述分离的核酸包含、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:26和/或27的核苷酸序列。

11.一种载体，其包含权利要求10的分离的核酸。

12.一种分离的细胞，其包含权利要求10的分离的核酸，和/或包含权利要求11的载体。

13.一种产生权利要求1-8中任一项的分离的PD-1抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括培养权利要求12的分离的细胞和纯化所述分离的PD-1抗体或其抗原结合片段。