[发明专利]一种完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒及其方法在审
| 申请号： | 201811579917.6 | 申请日： | 2018-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN109655615A | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 刘忠贵;李民友;张玲;罗宁;高国全;杨霞;段朝晖 | 申请（专利权）人： | 广州市进德生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/573 | 分类号： | G01N33/573;G01N33/532;G01N33/535;G01N21/76 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 宋静娜;郝传鑫 |
| 地址： | 510663 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 磷脂酶 脂蛋白 抗体 单克隆抗体 检测试剂 人脂蛋白 抗原 样本 辣根过氧化物酶标记 生物技术领域 抗原决定簇 待测样本 化学发光 技术实现 抗体夹心 空间邻近 连续检测 特异性强 洗涤过程 质量稳定 触发剂 复合物 灵敏度 试剂盒 双夹心 微孔板 校准品 吖啶酯 检测 包被 孵育 | ||
1.一种完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、试剂R2和触发剂，所述试剂R1包括吖啶酯标记的抗人脂蛋白相关磷脂酶A2抗体，所述试剂R2包括辣根过氧化物酶标记抗人脂蛋白相关磷脂酶A2抗体和抗氧化剂。
2.根据权利要求1所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述抗氧化剂包括抗坏血酸、尿酸、茶多酚、谷胱甘肽、硫代硫酸钠中的至少一种，优选地，所述抗氧化剂为抗坏血酸和硫代硫酸钠。
3.根据权利要求1所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述触发剂为对羟基肉桂酸、过氧化氢、过氧化脲中的至少一种，优选地，所述触发剂为对羟基肉桂酸和过氧化氢。
4.根据权利要求1～3任一项所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：
吖啶酯标记抗人脂蛋白相关磷脂酶A2抗体 0.5-10mg/L
所述试剂R2包括下述浓度的组分：
辣根过氧化物酶标记抗人脂蛋白相关磷脂酶A2抗体 0.1-2mg/L
抗坏血酸 0.01-1w/v％
所述触发剂包括下述浓度的组分：
H2O2 0.01-10w/v％
对羟基肉桂酸 0.01-10w/v％。
5.根据权利要求4所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括缓冲液、稳定剂和防腐剂。
6.根据权利要求5所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：
所述试剂R2包括下述浓度的组分：
所述触发剂包括下述浓度的组分：
H2O2 0.01-10w/v％
对羟基肉桂酸 0.01-10w/v％。
7.根据权利要求5或6所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液的pH为6.5-8.5，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、醋酸缓冲液、HEPES缓冲液中至少一种，优选地，所述缓冲液的pH为7.4，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
8.根据权利要求5或6所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、甘露醇、乙二胺四乙酸二钠、PEG 20000、吐温-20、EC氧化酶、酶稳定剂、甘油中的至少一种，优选地，所述稳定剂为牛血清白蛋白、PEG 20000、EC氧化酶、吐温-20和甘露醇。
9.根据权利要求5或6所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为叠氮钠、ProClin300、KY-100生物防腐剂中的至少一种。
10.根据权利要求1～9任一项所述的完全均相测定脂蛋白相关磷脂酶A2的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，在待测样本中加入试剂R1和试剂R2，在37℃孵育5-30min，加入触发剂，立即检测反应物的发光强度值，计算待测样本中脂蛋白相关磷脂酶A2的含量，其中，待测样本、试剂R1、试剂R2、抗氧化剂和触发剂的体积比为1:8:8:15。
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