[发明专利]一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定

权利要求书

1.一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、从鸡肠道中筛选分离到一株江都丛毛单胞菌；

(2)、把江都丛毛单胞菌经ICR小鼠急性毒性试验，确定其具有高度安全性，对人体无害；

(3)、把江都丛毛单胞菌样品经无菌生理盐水适当稀释后，按10％接种量接种于含一定浓度DON的培养基中，于120r/min，30℃震荡培养；

(4)、每培养7天，按10％接种量转接新鲜富集基中培养，培养基中DON终浓度依次为20～40μg/mL、40～60μg/mL、60～80μg/mL、80～100μg/mL，富集培养4次，HPLC法检测DON降解效果，获得DON降解微生物的初筛混合菌种；

(5)、选取初筛中降解效果最好的样品培养液进行复筛。采用DON终浓度为40～100μg/mL的权利要求3所述固体无机盐富集培养基上，平板涂布分离DON降解菌，并连续划线接种于LB平板上，获得纯种DON降解微生物培养物，HPLC法考察单菌对DON降解效果，选择降解效率高的纯种微生物。

2.根据权利要求1所述的一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定，其特征在于：所述步骤(3)中的培养基由Na₂HPO₄ 1.6g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，NaNO₃ 0.5g，(NH4)₂SO₄0.5g，CaCl₂·2H₂O 0.025g主要物质组成，通过蒸馏水定容至1L，115℃高压灭菌20min；用前加入2mL无菌微量金属元素溶液和1mL无菌维生素溶液即得。

3.根据权利要求2所述的一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定，其特征在于：所述维生素溶液配方为：生物素2mg，叶酸2mg，维生素B1 5mg，维生素B2 5mg，维生素B6 10mg，维生素B12 50mg，烟酸5mg，泛酸钙5mg，对氨基苯甲酸酯5mg，硫代乳酸5mg蒸馏水定容至1L，用前使用0.22μm无菌滤膜过滤除菌。