[发明专利]一种制备黑曲霉种子的方法和柠檬酸的发酵方法

说明书

本发明涉及微生物发酵技术领域，公开了一种制备黑曲霉种子的方法和柠檬酸的发酵方法，其中，黑曲霉种子的制备方法培养包括第一种子培养和第二种子培养，第二种子培养为多级种子培养，柠檬酸的发酵方法包括将第一种子培养和第二种子培养得到的黑曲霉种子接种到柠檬酸发酵培养基中进行发酵培养，实现了在不增加麸曲培养量的情况下，达到黑曲霉种子的连续培养的目的，能够有效降低黑曲霉麸曲的制作量、缩短种子罐培养时间以及提高种子罐的利用率和黑曲霉种子的质量，另外，在柠檬酸的发酵过程中，能够进一步提高柠檬酸的质量和稳定性。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种制备黑曲霉种子的方法和柠檬酸的发酵方法。

背景技术

现有柠檬酸生产工艺中，发酵培养工艺流程如图3所示，由于种子罐与发酵罐之间为一一对应关系，该发酵工艺中在发酵生产柠檬酸就需要大量制作黑曲霉麸曲(每瓶黑曲霉麸曲都是一个独立的培养单位)，具体的，现有的柠檬酸生产工艺具有如下缺陷：(1)黑曲霉麸曲制作工作量，劳动强度高，制作时间长；(2)种子罐培养前期，孢子处于吸水膨胀时期长达6-8小时，大大降低了设备利用率；(3)每个种子罐属于单批培养，种子罐质量不稳定。

因此，如何降低黑曲霉麸曲制作量，缩短种子罐培养时间、提高种子罐的利用率和黑曲霉种子的质量是柠檬酸生产中亟待解决的一个重要问题。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的黑曲霉麸曲制作量大、种子罐培养时间长、种子罐的利用率和质量较低的问题，提供一种制备黑曲霉种子的方法和柠檬酸的发酵方法，该制备黑曲霉种子的方法能够有效降低黑曲霉麸曲的制作量、大大缩短种子罐培养时间、提高种子罐的利用率和黑曲霉种子的质量，从而实现黑曲霉种子的连续培养，以及在柠檬酸的发酵过程中，能够进一步提高柠檬酸的质量和稳定性。

为了实现上述目的，本发明一方面提供一种制备黑曲霉种子的方法，该方法包括以下步骤：

(1)将黑曲霉麸曲接种到黑曲霉种子培养基中，进行第一种子培养，得到第一种子培养液，并将所述第一种子培养液中的黑曲霉进行球菌和菌丝的断裂和分离，得到第一菌丝和第一菌球；

(2)将步骤(1)得到的第一菌丝接种到黑曲霉种子培养基中，进行第二种子培养，得到第二种子培养液，并将所述第二种子培养液中的黑曲霉进行球菌和菌丝的断裂和分离，得到第二菌丝和第二菌球；

其中，所述黑曲霉种子包括第一菌球和/或第二菌球。

本发明第二方面提供一种柠檬酸的发酵方法，该方法包括：

(1)按照上述所述的方法制备黑曲霉种子；

(2)将步骤(1)制备得到的黑曲霉种子接种到柠檬酸发酵培养基中进行发酵培养。

通过上述技术方案，实现在不增加麸曲培养量的情况下，达到黑曲霉种子的连续培养，能够有效降低黑曲霉麸曲的制作量、缩短种子罐培养时间以及提高种子罐的利用率和黑曲霉种子的质量，另外，在柠檬酸的发酵过程中，能够进一步提高柠檬酸的质量和稳定性。例如，实施例1-6中的黑曲霉麸曲培养瓶仅为100个(在不增加麸曲培养量的情况下)，就可以进行第一发酵、第一级发酵、第二级发酵和第三级发酵(实施例6中可以只进行第一发酵)。

附图说明

图1是实施例1-5中制备黑曲霉种子和柠檬酸发酵的流程示意图；

图2是实施例6中制备黑曲霉种子和柠檬酸发酵的流程示意图；

图3是对比例1中制备黑曲霉种子和柠檬酸发酵的流程示意图。

附图标记说明

1 第一菌丝 2 第一级菌丝 3 第二级菌丝 4 第三级菌丝

具体实施方式