[发明专利]一种聚乙二醇修饰的血管内皮抑制素制剂组合物

说明书

本发明涉及一种聚乙二醇修饰的血管内皮抑制素组合物，所述组合物包含聚乙二醇化血管内皮抑制素、保护剂和缓冲体系，其中所述的聚乙二醇化血管内皮抑制素与保护剂的质量比为1:10～10:1；所述的缓冲体系为磷酸盐缓冲体系；在制备过程中，当使用磷酸盐缓冲体系作为缓冲剂时，获得的冻干制剂的pH变化较小，十分有利于产品的储藏和货架稳定性。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，特别涉及一种聚乙二醇化的血管内皮抑制素制剂组合物及其制备方法。

背景技术

血管内皮抑制素(Endostatin)是胶原X VIII羧基段的一段分子量大小为20kDa的酶切产物，其于1997年，被哈佛大学的学者O’Reilly等从小鼠血管内皮瘤细胞的培养基发现，其具有抑制血管内皮细胞增殖、迁移等作用。研究表明，血管内皮抑制素可有效控制非小细胞肺癌、结肠癌、脑胶质瘤、纤维瘤、间皮瘤及淋巴瘤等各种实体瘤的生长、浸润和转移。罗永章等人在天然血管内皮抑制素的N末端添加了9个氨基酸，使得该药物稳定性提高。先声药业开发了重组人血管内皮抑制素注射液(商品名恩度)，该药物联合NP化疗方案用于治疗初治或复治的III/IV期非小细胞肺癌患者。

专利申请CN104961831A公开了一种聚乙二醇化血管内皮抑制素，是由聚乙二醇与血管内皮抑制素偶联形成的复合物，血管内皮抑制素在聚乙二醇化后在保留天然蛋白的生物活性的同时，增强了血管内皮抑制素的体内稳定性，提高了血药浓度，延长了生物半衰期，同时减轻了病人的经济负担。

由于难以通过口服吸收屏障以及在胃肠道中的降解，蛋白质药物普遍采用注射剂的形式给药。其中冷冻干燥技术广泛应用于蛋白质药物注射剂的制备。目前国内已有注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、注射用重组人干扰素α2b、冻干鼠表皮生长因子等多种蛋白质冻干制剂获准上市。已上市销售聚乙二醇化蛋白质药物等也均采用了冻干粉针的形式，本发明涉及一种聚乙二醇化血管内皮抑制素注射剂，优选的形式为冻干粉针剂形式。

血管内皮抑制素注射剂采用醋酸盐缓冲液作为缓冲剂，根据文献报道，重组人血管内皮抑制素(ENDO)在酸性环境中较为稳定。本发明在研究前期亦选用HAc-NaAc作为缓冲体系，然而在冻干过程中发现以HAc-NaAc为缓冲体系时，冻干前后样品pH值偏差较大，这十分不利于药品的稳定性。然而发明人惊讶地发现，在制备过程中，当使用磷酸盐缓冲体系作为缓冲剂时，获得的冻干制剂的pH变化较小，十分有利于产品的储藏和货架稳定性。

发明内容

本发明涉及一种聚乙二醇修饰的血管内皮抑制素组合物，所述组合物包含聚乙二醇化血管内皮抑制素、保护剂和缓冲体系，其中所述的聚乙二醇化血管内皮抑制素与保护剂的质量比为1:10～10:1；所述的缓冲体系为磷酸盐缓冲体系。

所述组合物为注射液或冻干粉针剂或冻干制备液。

当所述的组合物为注射液时，其注射液的pH在5-8之间，优选在5.5～6.5之间，更优选在5.7-6.1之间；当所述组合物为冻干粉针剂时，其制剂复溶后的pH在5-8之间，优选在5.5～6.5之间，更优选在5.7～6.1之间；当所述的组合物为冻干制备液时，所述制备液的pH在5-8之间，优选在5.5～6.5之间，更优选在5.7～6.1之间。

当所述组合物为冻干粉针剂时，所述冻干粉针剂在冻干前后的pH变化＜0.5，优选地所述的pH变化＜0.4，优选地所述pH变化＜0.3，更优选所述pH变化＜0.25。

所述的聚乙二醇修饰的血管内皮抑制素也称为聚乙二醇化的血管内皮抑制素。

其中，血管内皮抑制素(Endostatin)选自天然血管内皮抑制素或重组血管内皮抑制素，优选地，所述的重组血管内皮抑制素具有SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的序列。

SEQ ID No.1：