[发明专利]一种VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法在审
| 申请号： | 201811584956.5 | 申请日： | 2018-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN109735481A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 赵力超;吕新瑞;张竟丰;王丽;曹潇 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/36 | 分类号： | C12N1/36;C12N1/20 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 阪崎肠杆菌 诱导培养 培养液 抗生素 诱导 氨苄青霉素 培养液离心 复苏 常规培养 对数期 可恢复 有效地 致病性 乳制品 重悬 沉淀 接种 验证 检测 | ||
1.一种VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.阪崎肠杆菌的增菌培养：将阪崎肠杆菌接种后，培养至对数期，得到培养液；
S2.阪崎肠杆菌VBNC状态的诱导：使用抗生素与步骤S1中的培养液进行诱导培养，诱导培养的操作为：取步骤S1中的培养液离心，取沉淀，重悬，诱导培养浓度至108 CFU/mL以下；
其中，抗生素为氨苄青霉素，抗生素在诱导培养后的培养液中浓度为50~1600 μg/mL。
2.根据权利要求1所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，步骤S1中增菌所用培养基为LB肉汤培养基、改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素或肠道菌增菌肉汤。
3.根据权利要求2所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，步骤S2中经过诱导后进行常规定量和/或定性分析。
4.根据权利要求1所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，步骤S1中首先将阪崎肠杆菌单菌落接种，然后加入培养基，培养条件如下：37±1℃下恒温培养18~24h，再挑取单菌落接种于培养基中，37±1℃下培养12~18h。
5.根据权利要求1所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，诱导培养浓度至106~107 CFU/mL。
6.根据权利要求1所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，步骤S2中抗生素进行诱导的环境条件为：温度20~25℃，湿度70~85％。
7.根据权利要求1所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，步骤S2中，将阪崎肠杆菌诱导至VBNC状态后，进行复苏。
8.根据权利要求7所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，复苏的操作为营养复苏和/或无营养复苏。
9.根据权利要求1所述VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，其特征在于，步骤S2中将培养液在8000~12000rpm/min下离心5~10分钟。
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