[发明专利]以外泌体为载体的肿瘤靶向热疗材料的制备方法及其产品在审
申请号: | 201811592715.5 | 申请日: | 2018-12-25 |
公开(公告)号: | CN109432427A | 公开(公告)日: | 2019-03-08 |
发明(设计)人: | 何丹农;张迎;朱君;王若晨;李念念;王萍;金彩虹 | 申请(专利权)人: | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 |
主分类号: | A61K41/00 | 分类号: | A61K41/00;A61K47/46;A61P35/00 |
代理公司: | 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 | 代理人: | 董梅 |
地址: | 201109 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺癌细胞 肿瘤靶向 热疗 靶向性 制备 分泌 纳米复合材料 超高速离心 肺肿瘤细胞 生物相容性 生物体 光热效应 金纳米棒 纳米金棒 热疗效果 共孵育 光热 可用 肺癌 合成 死亡 | ||
1.一种以外泌体为载体的肿瘤靶向热疗材料的制备方法,其特征在于以肺癌细胞A549分泌的外泌体为载体,将合成的纳米金棒与外泌体共孵育,得到具有光热疗效对肺癌细胞具有靶向性的纳米复合材料,包括以下步骤:
(1)纳米金棒的制备
在质量份为5~50份蒸馏水中,加入摩尔比为0.1:1的高氯酸金和表面活性剂,搅拌均匀后加入还原剂,还原剂与高氯酸金的摩尔比为1:1,继续搅拌,当溶液由深棕黄色变为无色后,加入0.1~2份的无机盐溶液,保持反应温度15~35℃,反应8~24小时后,离心、蒸馏水洗涤3次,得到尺寸均匀长径比为1.8~6的纳米金棒;
(2)外泌体的提取
将A549肺癌细胞在5% CO2细胞培养箱内37℃条件下培育并经多次传代,使用离心机将收集的培养液与细胞分离,取上清液在4℃条件下依次300g、2000g、10000g 离心0.5~4小时,以去除细胞与细胞碎片,再以 10000~100000 g 超速离心1~4小时达到分离、富集外泌体的目的,用磷酸缓冲液(PBS)清洗可部分去除残存蛋白质;
(3)外泌体吞噬金棒
将得到的外泌体加入合成的纳米金棒在一定的条件下共孵育0.5~2小时,得到所需产物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的表面活性剂为聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵、聚氧乙烯中的一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的还原剂为硼氢化钠、柠檬酸三钠、维生素 C、硼氢化钾中的一种。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的盐为氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、硝酸钾、硝酸钠、硝酸银中的一种。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的共孵育条件为5% CO2细胞培养箱内37℃,常压条件下、5% CO2细胞培养箱内37℃条件下0.5Pa压力下条件的一种。
6.一种以外泌体为载体的肿瘤靶向热疗材料,其特征在于根据权利要求1-5任一所述方法制备得到。
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