[发明专利]家族性高胆固醇血症基因检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种家族性高胆固醇血症基因检测用的试剂盒，该试剂盒包括同时检测LDLR基因SEQ 1中第207位变异位点、LDLR基因SEQ 2中第357位变异位点、PCSK9基因SEQ 3中第255位变异位点、LDLRAP1基因SEQ 4中第558位变异位点和APOB基因SEQ 5中第398位变异位点的特异性引物及二代测序检测的常规组件等。本发明的试剂盒通过二代测序技术同时检测分析LDLR基因、PCSK9基因、LDLRAP1基因和APOB基因上的变异位点，可快速、低成本的在临床上辅助诊断FH患者。

技术领域

本发明涉及医学和生物技术，具体涉及一种家族性高胆固醇血症基因检测用的试剂盒，该试剂盒可基于二代测序技术同时检测LDLR基因、PCSK9基因、LDLRAP1基因和APOB基因的变异位点，从而在临床上辅助诊断患该疾病的个体。

背景技术

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholesterolemia，FH)是一种以血浆低密度脂蛋白胆固醇浓度显著升高为特征的遗传性疾病，其它临床特征表现为总胆固醇(TC)水平显著升高、脂类在皮肤肌腱和动脉处堆积，引起早发性动脉粥样硬化，增加心血管疾病的发生风险，严重者青少年时期可发生冠心病甚至心梗死亡。

家族性高胆固醇血症主要分二种类型：杂合子FH，属于这一类者，子女从父母一方中遗传FH基因；纯合子FH，属于这一类者，子女从父母双方遗传FH基因。在西方国家，普通人群中杂合子FH的患病率在1/200-1/600，有奠基者效应的地区(例如南非、加拿大的魁北克和黎巴嫩等)除外。以往报道的纯合子FH患病率大概是1/100万，目前的患病率可能是之前预测的3倍左右。因此，据估计世界范围内有将近3600万的FH患者，在中国则有将近380万FH患者。

而目前的数据显示，在大多数国家，FH都没有得到充分的诊断和治疗，尤其是在国内，FH没有得到广泛的重视。由于缺乏足够的重视和有效的检测方法，我国FH患者的诊断率较低，目前国内FH的发病率还是未知的。

2016年国际动脉粥样硬化学会(IAS)专家组对严重家族性高胆固醇血症(FH)发布的共识声明指出，高胆固醇血症是动脉粥样硬化心血管疾病的一个独立因素。另外，FH的严重程度与开始治疗的年龄也有关系，晚期治疗的患者具有更高的动脉粥样硬化性心血管疾病风险。英国一项对3382例FH患者长达26年的随访结果提示，管理欠佳的FH患者常有更高的死亡率和心血管事件再发率。基于以上数据，FH患者早期诊断和积极干预十分重要，而基因检测可以帮助FH的早期诊断。因此，开发适用于家族性高胆固醇血症的高通量基因检测试剂盒，将有助于尽早诊断FH患者并对其进行管理和干预治疗，解决临床上一类脂质代谢疾病的辅助诊断难题。

目前，FH的基因检测主要通过一代测序方法，该方法相对比较成熟、全面、读长较长、准确性高，判读结果相对简单；但是它也有不可避免的缺点，如操作相对繁琐不能自动化，测序成本高、通量低，能够检测的突变类型比较单一，对于多位点、大样本病例筛查还是难以完成的。

发明内容

本发明提供一种应用二代测序法的家族性高胆固醇血症基因检测试剂盒，可以解决现有技术中的上述缺陷。

本发明的技术方案如下：

一种家族性高胆固醇血症基因检测试剂盒，该试剂盒包括：检测LDLR基因SEQ 1中第207位变异位点、LDLR基因SEQ 2中第357位变异位点、PCSK9基因SEQ 3中第255位变异位点、LDLRAP1基因SEQ 4中第558位变异位点和APOB基因SEQ 5中第398位变异位点的特异性引物对。所述特异性引物对可以为引物混合液。