[发明专利]多肽SLE2018-V003在诊断系统性红斑狼疮试剂盒中的应用

说明书

本发明公开一种多肽SLE2018‑V003在诊断系统性红斑狼疮试剂盒中的应用；该试剂盒是将氨基酸序列为ISTVYTGLTEKD的多肽SLE2018‑V003作为抗原，通过SMCC连接在BSA上包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入待测血清，再加入含有HRP标记anti‑Human IgG抗体的酶标试剂，形成多肽‑抗体‑酶标二抗复合物，经洗涤后加3,3',5,5'‑四甲基联苯胺(TMB)显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色，用颜色的深浅检测样品中特异性识别该多肽的IgG抗体水平。本发明所提供的试剂盒，可大大提高系统性红斑狼疮早期诊断的特异性和灵敏度。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种多肽SLE2018-V003在诊断系统性红斑狼疮试剂盒(组合物)中的应用。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种临床表现为多系统损害的自身免疫介导的自身免疫性疾病(autoimmune diseases，ADs)，常引起多器官系统的不可逆损害，严重影响患者的寿命和生活质量。系统性红斑狼疮疾病的发生率在0.02％～0.07％范围内，城市人群的发病率更高，患者年龄主要分布在15～45岁，且女性患者居多，男女发病比例约为1:9(Lupus 2006.15(5):308–318.)。对系统性红斑狼疮的流行率、病理机制和其生物标志物的研究是系统性红斑狼疮研究的三个重要方面。系统性红斑狼疮的临床表现具有多样性，血清学和免疫学指标变异性很大。该自身免疫疾病涉及多器官，包括皮肤、肾脏、脑，除了这些器官外往往伴有关节的损伤，因此免疫反应是全身性的。引起自身免疫应答的自身组织成分被称为自身抗原，包括隐藏的自身抗原(在胚胎期从未与自身淋巴细胞接触过，机体不能识别为自身物质)和修饰的自身抗原(在感染、药物、烧伤、电离辐射等因素影响下，自身组织的构象发生改变，成为自身抗原)。机体产生自身抗原时，由于将其识别为异己部分，产生对应的自身抗体进行抵抗。这些自身抗原或自身抗体在疾病表型显现的前期往往已经产生，并且表达量通常随着病情的演化呈现出一定的趋势。根据这一特点，这些自身抗原或自身抗体可被当做诊断疾病的生物标志物。

生物标志物是一种测量工具，科研人员利用生物标志物诊断疾病的发生、复发、预后，并用于治疗效果的动态评估。及时对系统性红斑狼疮的诊断仍是一个巨大的挑战，能早期准确地诊断出系统性红斑狼疮的生物标志物是关键。优良的系统性红斑狼疮生物标志物应该具备的条件是：能准确地对系统性红斑狼疮进行诊断；诊断过程对患者无不良反应。目前，疾病生物标志物主要包括基因水平标志物、细胞水平标志物和血清水平标志物等。对于系统性红斑狼疮，已知的免疫靶标(或是自身抗原)主要为细胞核组分，包括ds-DNA染色体相关蛋白，Ro蛋白(SSA)，La蛋白(SSB)及Sm蛋白。对于系统性红斑狼疮的诊断，自1971年美国风湿病学会(American College of Rheumatology，ACR，1988年前称AmericanRheumatism Association，ARA)首次制定了系统性红斑狼疮诊断标准以来，系统性红斑狼疮的临床诊断标准就在不断完善中。在1982年的修订中首次增加了血清学指标(抗核抗体、抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体)，并在制订过程中采用生物统计分析，经验证后用于临床诊断。1997年的修订中，增加了“抗心磷脂抗体阳性和狼疮抗凝物阳性”这一标准，虽然未经过验证，但血清学标志物一直是研究重点。(J Nephrol Dialy Transplant[J]Vol.22No.2Apr.2013:153-157.)

血清蛋白组学是寻找系统性红斑狼疮的有效手段之一。在自身免疫病发生、发展的过程中，自身抗体表达量的变化会影响血清蛋白质组的组成，这在血清生物标志物的发现中具有重要价值。因此，越来越多科研人员将目光定格在血清蛋白质标志物的研究上，力求在蛋白质组学层面上寻找生物标志物，建立诊断、预后、药效评估的多参数模型。