[发明专利]一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法

说明书

本发明涉及一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法，以磷酸酯类载体替代固相树脂，在脱水偶联剂的作用下与保护甘氨酸(Fmoc‑Gly‑OH)的C‑端连接；借助磷酸酯类载体在不同溶剂系统中易结晶沉淀的特性，可将生成物与其他杂质分离，经过多肽偶联后采用侧链脱、剪除载体和谷胱甘肽的分离纯化得到谷胱甘肽结晶。与目前已有的合成方法相比，本发明兼备了液相和固相合成法的优点，可以更加简便、快捷、节约、高效地合成制备谷胱甘肽，而且磷酸酯类载体可以回收并直接再利用，降低原材料浪费，减少废弃物污染，节约成本，利于环保。

技术领域

本发明属于有机化学与多肽合成领域，，涉及一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法。本发明以磷酸酯类小分子为载体替代固相树脂载体，辅助分离纯化，兼备了液相和固相合成法的优点，可以更加简便、快捷、节约、高效地合成制备谷胱甘肽及其衍生物，而且磷酸酯类载体可以回收并直接再利用，降低原材料浪费，减少废弃物污染，节约成本，利于环保。

背景技术

1888年，谷胱甘肽(GSH)首先从酵母中分离出来。日本1983年进行了含量较多的GSH酵母的生产，其后又研究了GSH提取、分离技术及分析检测方法。目前国外实现了GSH规模生产。世界主要的氨基酸制造商Kyowa，Aji-nomoto和Degussa等都相继投巨资于氨基酸的研究与开发，仅Kyowa 1998年氨基酸的研究与开发就耗费达1.9亿美元，而GSH是其重点之一，Kyowa目前是GSH主要的供应商。目前GSH的主要生产方法有：萃取法、发酵法、酶法和化学合成法。

1.萃取法：见文献：

Ikeno,Y.；Tanno,K.L；Omori,I.Glutathione.1976,JP l87299.

Kono,G.；Hareda,M.；Sugisaki,K.High glutathione containing yeast.1976,JP.

a)李从军。还原型谷胱甘肽分离纯化的研究。华中科技大学硕士学位论文，2007.

b)马建。分离纯化还原型谷胱甘肽的工艺研究。华南理工大学硕士学位论文，2012.c)刘超。谷胱甘肽的发酵生产及其分离纯化。济南大学硕士学位论文，2012.

萃取法主要是通过萃取和沉淀的方法从GSH含量比较高的动植物组织中将GSH分离提取的一种方法，GSH的早期生产都是采用萃取法，是生产GSH的经典方法，也是发酵法生产流程中的下游过程基础。其工艺路线如图3：

该方法的不足：由于GSH在微生物或动植物的组织中含量极低，可用原料少，制备的纯度和收率都不高，故在实际生产中应用不广泛。

2.发酵法，

文献：

Miwa,N.；Tajima,S.Production of glutathione by fermentation.1977,JP94089.

Miwa,N.；Tajima,S.Production of glutathione by fermentation.1977,JP94088.

Kono,G.；Harada M.；Yokoyama,M.Glutathione by fermentation.1983,JP.

李华钟，林金萍，李寅。谷胱甘肽的生物合成。中国医药工业杂志,2000，31(5),236-239.

王爽。微生物法制备还原型谷胱甘肽的工艺研究。大连工业大学硕士学位论文，2011.

詹谷宇，田萍，刘卫东等。酵母菌生物合成谷胱甘肽。药学学报,1990,29(7),494-499.b)董坤，

朱希强，王凤山。发酵法生产还原型谷胱甘肽的研究进展。中国生化药物杂志，2012,33(4),511-514.