[发明专利]一种抗虫蛋白Cry1C的胶体金免疫层析速测卡

权利要求书

1.一种抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，包括卡壳和卡壳内的试纸条，卡壳上设有加样孔和观察窗，试纸条包括底板及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，所述加样孔设于样品垫上方，所述观察窗设于反应膜上方，所述反应膜上设有检测线和质控线，其特征在于，所述金标垫包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体-胶体金结合物；所述抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.16697的杂交瘤细胞株3H3 1D2分泌得到；反应膜上设有的包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.16698的杂交瘤细胞株5E101C6分泌得到。

2.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述反应膜上的检测线包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体，质控线包被羊抗鼠IgG。

3.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述检测线和质控线间隔0.5-1.0cm。

4.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述样品垫与金标垫、金标垫反应膜、反应膜与吸水垫之间均设有1-2mm的重叠区。

5.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述底板为聚氯乙烯板，所述反应膜为硝酸纤维素膜。

6.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述样品垫由玻璃纤维膜或滤纸制成，所述吸水垫由滤纸制成。

7.权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)待测样品前处理：若待测样品为液体，取40-60μL待测样品直接进行检测，若待测样品为非液体，则取待测样品90-110mg磨碎，加入0.5-1.5mL样品处理液充分混匀，冰上静置25-35min后取上清40-60μL检测；

所述样品处理液的配方为：1M Tris,pH 7.5 500uL，1M NaCL 1.5mL，0.5M EDTA20uL，50％甘油2mL，10％SDS 1mL，用双蒸水配成10mL，使用时添加1片蛋白酶抑制剂及50uL的1mM苯甲基磺酰氟；

2)检测：将待测样品滴入加样孔内，室温下作用5-10min，然后观察结果；

3)检测结果分析：

阳性：质控线、检测线均呈现条带，说明待测样本中有Cry1C蛋白存在；

阴性：检测线不出现条带，质控线呈现条带，说明待测样本中没有Cry1C蛋白存在；

失效：如果检测线、质控线均不出现条带或仅有检测线出现条带，说明试纸条失效。