[发明专利]一种同时检测顺反棕榈油酸的方法

说明书

本发明涉及单不饱和脂肪酸同分异构体的检测领域，具体涉及同时检测顺反棕榈油酸的方法，该方法采用高效液相色谱或者超高效液相色谱法，可采用紫外检测器检测色谱信号，也可采用质谱检测器检测质谱信号，紫外检测器可作为常规量(ug或mg级)的检测，质谱检测器可用于微量或痕量(ng级)的检测，可用于临床诊断。该方法具有稳定性好，精密度高，线性范围宽，适用范围广等优点。

技术领域

本发明涉及食品检测领域，具体涉及一种同时检测顺/反棕榈油酸的方法。

背景技术

顺/反棕榈油酸是棕榈油酸的同分异构体，棕榈油酸(Palmitoleic acid)是一种16碳的单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acid，MUFA)，双键位于碳端的第7个碳原子上(16:1,n-7)，近年来，棕榈油酸在一些慢性疾病如糖尿病、代谢综合症和炎症中具有治疗作用，引起人们广泛关注。顺式棕榈油酸在大多数动植物种均有分布，但含量较高的物种稀少，现其主要来源为沙棘果油，鱼油和一些海洋浮游生物，在鱼油中，棕榈油酸的含量约有15％～20％，在哺乳动物皮下脂肪中也有发现。近几年反式棕榈油酸在牛乳中被发现，具有调节糖脂代谢的作用，被当做II型糖尿病和冠心病的生物标志物。

顺/反棕榈油酸是构型不同的异构体，化学性质极为相似，但是作用机理不同，故研究分析并区分顺反棕榈油酸对临床诊断具有指导意义。

结构式1为顺式棕榈油酸，结构式2为反式棕榈油酸。

发明内容

本发明的目的是提供快速、高效、稳定、适用范围广的同时检测顺反棕榈油酸的方法。

本发明采用的技术方案如下：

一种同时检测顺反棕榈油酸的方法，步骤如下：

步骤1)对照品溶液的配制：分别精确称取1-10mg的顺式棕榈油酸及反式棕榈油酸的对照品，置于容量瓶中，加甲醇或乙腈稀释至刻度，摇匀，即得；

步骤2)样品前处理：样品加甲醇或乙腈提取，离心，过0.22um滤膜，作为待测样品；

步骤3)液相色谱条件：流动相为乙腈与水的体积比为80:20，色谱柱为BDSC18柱，流速1ml/min，柱温为40℃；检测器检测；

步骤4)绘制标准工作曲线：按步骤3)液相色谱条件进样测定，以对照品溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得线性方程。

步骤5)测定样品含量：按步骤3)液相色谱条件进样测定，对步骤2)制备的待测样品溶液进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，根据色谱峰的保留时间定性，根据色谱峰的峰面积进行定量。

优选的，所述检测器为紫外检测器或质谱检测器。

优选的，所述检测器为紫外检测器时，吸收波长设置为205nm。

优选的，所述检测器为ESI源质谱检测器时，设置为负离子模式或者正离子模式。

优选的，所述BDS C18柱型号为BDS C18,100*4.6mm,2.4um或BDS C18,100*2.1mm,2.4um。

本发明另一方面提供一种同时检测血清或血浆样品中顺反棕榈油酸的方法，步骤如下：

步骤1)对照品溶液的配置：往血清或血浆加提取溶剂提取棕榈油酸，作为空白基质样品，分别在血清中加入1-10mg的顺式棕榈油酸及反式棕榈油酸的对照品溶液，加提取溶剂，充分提取，20000rpm离心，分离上清，0-20℃下挥干溶剂，流动相复溶，过0.22um滤膜；

步骤2)血液样品前处理：往血清或血浆中，加入提取溶剂，充分提取，20000rpm离心，分离上清，0-20℃下挥干溶剂，流动相复溶，过0.22um滤膜，作为待测样品；