[发明专利]一种驯化裂殖壶菌产油脂的方法

权利要求书

1.一种驯化裂殖壶菌产油脂的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）将保存在甘油管中的裂殖壶菌以2~10%的接种量接种至pH为6.4~6.6的新鲜的种子培养基中，于温度27~29℃及转速180~220rpm的条件下培养45~50h，获得一级种子；

（2）将上述一级种子以4~6%的接种量接种至pH为6.4~6.6的新鲜的种子培养基中，于温度27~29℃及转速180~220rpm的条件下培养45~50h，获得二级种子；

（3）将上述二级种子接种至pH为6.4~6.6且葡萄糖的含量为30~180g/L的第一级高糖驯化培养基中进行驯化培养获得第一代后，进行连续传代的驯化培养，每驯化培养9~11代，接种至葡萄糖的含量高30g/L且pH为6.4~6.6的下一级高糖驯化培养基中继续进行连续传代的驯化培养，直至葡萄糖的含量达到90~210g/L，再进行连续驯化培养9~11代，获得高糖驯化菌株；

该步骤中各培养的条件如下：接种量为2~10%，培养温度为27~29℃，转速180~220rpm，培养时间为45~50h；各上述高糖驯化培养基由上述种子培养基添加葡萄糖而成；

（4）将上述高糖驯化菌株接种至发酵罐中的发酵培养基扩大培养10~12d，期间分析不同时期内的油脂组分。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）为：将保存在甘油管中的裂殖壶菌以2~10%的接种量接种至pH为6.5的新鲜的种子培养基中，于温度28℃及转速200rpm的条件下培养48h，获得一级种子。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）为：将上述一级种子以5%的接种量接种至pH为6.5的新鲜的种子培养基中，于温度28℃及转速200rpm的条件下培养48h，获得二级种子。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中各培养的条件如下：接种量为2~10%，培养温度为28℃，转速200rpm，培养时间为48h。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（4）包括：

a、将所述高糖驯化菌株接入发酵罐中的发酵培养基扩大培养10~12d，用水杨酸法监测糖量，当糖浓度过低时，间歇流加葡萄糖溶液，发酵至中期，即95~97h时，通过加料口补入无机盐；

b、每11~13 h取样，进行生物量、油脂总量和油脂组分鉴定分析。

6.如权利要求1至5中任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述种子培养基的配方包括：酵母粉9~11 g/L、硫酸钠11~13 g/L、氯化钾0.4~0.6 g/L、硫酸镁1.8~2.2 g/L、硫酸钾0.60~0.70 g/L、磷酸二氢钾0.8~1.2 g/L、硫酸铵0.8~1.2g/L、二水合氯化钙0.16~0.18g/L。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述种子培养基的配方包括：酵母粉10 g/L、硫酸钠12 g/L、氯化钾0.5 g/L、硫酸镁2 g/L、硫酸钾0.65 g/L、磷酸二氢钾1 g/L、硫酸铵1g/L、二水合氯化钙0.17 g/L。