[发明专利]青龙衣中一种三萜类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种三萜化合物及其制备方法和用途，属于新化合物和其药物用途。其特征是通过有机溶剂提取结合吉拉德试剂处理、柱色谱等方法，从青龙衣的新鲜果皮中提取、分离纯化得到一种新的三萜类化合物α‑环戊酮‑21，22‑骈合3，10‑环氧‑5‑羟基‑齐墩果烷‑19，22‑二环[2，2，0]‑己烷，命名为青龙衣三萜酮A。本发明化合物经实验证实具有较好的抑制肿瘤细胞生长作用，具有抗肿瘤方面的应用前景。

技术领域

本发明具体涉及一种具有癌细胞抑制作用的新的三萜类化合物。

背景技术

恶性肿瘤是危害人类健康的三大疾病之一，具有较高的发病率和死亡率。现代西医治疗主要以化疗为主，毒副作用较大，患者生存期质量明显下降。中医药在抗癌防癌、减少不良反应等方面发挥了独特优势，是研发新型抗肿瘤药物的宝库。目前来源于中草药的抗癌制剂，占总抗癌药30%以上，如紫杉类、喜树碱、长春新碱等已经作为对抗抗肿瘤的首选药。

青龙衣，是胡桃科胡桃属植物核桃楸Juglands mandshurica Maxim.和核桃J.ragia L.未成熟果实的外果皮，在我国民间已有广泛的应用基础，常被用于急慢性胃痛、肠鸣腹泻、疥癣等。现代药理研究表明，它具有抗炎、镇痛、抗菌和抗肿瘤等作用，特别是抗肿瘤作用尤为显著，已被人们普遍认同。据报道青龙衣对胃癌、肺癌、肝癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤均有良好的疗效，但目前已发现的主要成分类型——萘醌类虽然抑制肿瘤生长效果显著，但毒性大，稳定性差，作为临床用药存在较大的安全隐患。为了充分利用该药用资源，本研究组继续开展了深入系统的化学成分研究，目的是从中筛选出高效、低毒、稳定的药效物质基础。在对青龙衣三萜类成分分离过程中，得到了一个新的三萜酮类化合物，已明确了该化合物的化学结构、药理活性和用途。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的三萜类化合物及其制备方法以及该新化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，解决目前青龙衣中主要抗肿瘤活性成分毒性大、稳定性差的弊端，扩大治疗肿瘤药物的来源。

本发明的新三萜类化合物是从青龙衣中提取、分离、纯化得到，化学名称为α-环戊酮-21，22-骈合3，10-环氧-5-羟基-齐墩果烷-19，22-二环[2，2，0]-己烷，俗名为青龙衣三萜酮A。

化学结构式为：

本发明还提供了青龙衣三萜酮A的制备方法：以核桃青皮为原料，依次醇提取、大孔树脂富集、吉拉德试剂纯化处理以及柱色谱分离等制备得到。

上述柱层析依次包括大孔树脂柱、正相硅胶柱、葡聚糖凝胶柱。

本发明青龙衣三萜酮A具体制备步骤如下：

（1）醇提：将核桃楸Juglans mandshurica Maxim青果皮鲜品低温40℃烘干，得到5kg的干燥品为原料，采用95%乙醇30L回流提取3次，每次2h，过滤并合并乙醇提取液，减压回收溶剂，干燥，得乙醇浸膏；

（2）富集纯化：将步骤（1）所得浸膏提取物用水分散至相对密度为1.18±0.05g/mL的溶液，经AB-8或D101型大孔树脂柱色谱富集纯化，分别以水、50%乙醇、80%乙醇依次洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，调至密度为1.05g/mL的水溶液。水液反复5次穿过活性炭层（层高10cm，直径30cm）进行减压抽滤除杂，再将水液浓缩蒸干后，分别加入无水乙醇、吉拉德试剂P及12%（V/V）醋酸进行捏溶，再水浴50℃温热10h，反应结束后加水稀释，加入同体积乙醚萃取三次，得到乙醚浸膏；