[发明专利]一种利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法

权利要求书

1.一种利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：

(1)合成PCN-333

将2,4,6-三(4-羧基苯基)-1,3,5-三嗪与六水合三氯化铝按质量比为1:2～4加入N,N-二乙基甲酰胺中或将2,4,6-三(4-羧基苯基)-1,3,5-三嗪与三氯化铁按质量比为1:0.6～1.5加入N,N-二乙基甲酰胺中，并加入聚乙烯吡咯烷酮，超声至固体完全溶解，然后加入三氟乙酸，混合均匀，所得混合液在100～130℃下加热搅拌17～24h，反应完后离心分离，固体经洗涤、干燥，得到粒径为250～300nm的PCN-333；

(2)功能化PCN-333

将PCN-333、N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基硫代琥珀酰亚胺按质量比为1:4～22.5:8～50加入超纯水中，常温振荡反应30～40min后，用超纯水将固体离心洗涤，得到功能化PCN-333；

(3)合成酶标抗体复合物

将功能化的PCN-333加入pH＝7.4的磷酸盐缓冲液中，再加入抗体，常温振荡孵育30～40min后，在4℃下孵育10～15h，用PBS离心洗涤收集固体；所得固体分散于pH＝7.4的磷酸盐缓冲液中，再加入酶，振荡孵育后，离心收集固体，用封闭液封闭后，分散于含牛血清白蛋白的稀释液中，得到酶标抗体复合物，于4℃下储存；

上述功能化的PCN-333与抗体、酶的质量比为1:0.1～0.3:0.01～0.2。

2.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述2,4,6-三(4-羧基苯基)-1,3,5-三嗪与N,N-二乙基甲酰胺的质量-体积比为1mg:0.4～1.4mL。

3.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述2,4,6-三(4-羧基苯基)-1,3,5-三嗪与三氟乙酸的质量-体积比为1mg:0.01～0.02mL。

4.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(1)中，所得混合液中聚乙烯吡咯烷酮的浓度为0.4～0.6mmol/L，其中所述的聚乙烯吡咯烷酮的数均分子量为5000～10000。

5.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(1)中，所得混合液中聚乙烯吡咯烷酮的浓度为0.02～0.03mmol/L，其中所述的聚乙烯吡咯烷酮的数均分子量为40000～50000。

6.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述PCN-333、N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基硫代琥珀酰亚胺的质量比为1:4.5～10:10～20。

7.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述的抗体为第一抗体或第二抗体。

8.根据权利要求1所述的利用金属有机框架材料制备酶标记抗体的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述的酶为辣根过氧化物酶、微过氧化物酶、碱性磷酸酶、细胞色素c中任意一种。