[发明专利]无血清纳米材料冻存剂及其制备方法、使用方法,冻存液在审
申请号: | 201811618902.6 | 申请日: | 2018-12-28 |
公开(公告)号: | CN109497043A | 公开(公告)日: | 2019-03-22 |
发明(设计)人: | 李梓菲;栾杰;王黔;穆大力;刘春军;辛敏强;付苏 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院整形外科医院 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 张勋 |
地址: | 100000*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冻存 氧化石墨烯 纳米材料 无血清 制备 血清替代物 细胞 存活率 冻存液 血清 复配 性状 复苏 保存 应用 | ||
本发明提供了一种无血清纳米材料冻存剂及其制备方法、使用方法,冻存剂包括DMSO、血清替代物以及氧化石墨烯组成。本发明的冻存剂不含有任何血清成分,并同时复配了氧化石墨烯来调整溶液的性状,使其更利于细胞的保存,冻存效果也更为优异,与传统冻存剂相比,复苏后的细胞在存活率上有明显的提高,因此值得广泛推广进行应用。
技术领域
本发明涉及细胞冻存领域,具体而言,涉及一种无血清纳米材料冻存剂及其制备方法、使用方法,冻存液。
背景技术
细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,利用冻存技术可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。
目前现有技术中,细胞冻存液中的主要成分有10%二甲基亚砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS)、剩余组分为不完全培养基。培养基以及FBS可为细胞提供必要的营养物质。DMSO是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,从而达到降低细胞损伤的保护效果。但FBS属于动物源性物质,成分比较复杂,在临床应用上存在潜在的风险,也增加了污染的几率,并且由于冻存液中含有动物血清,会导致冻存液的成分存在不稳定的因素,此外细胞冻存后的复温过程多为水浴复温,复温效能低下,复温过程中细胞损伤大。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种无血清纳米材料冻存剂,该冻存剂不含有任何血清成分,避免了冻存液会被污染的潜在弊端的存在,成分也更加稳定,并同时复配了氧化石墨烯来调整溶液的性状,使其更利于细胞的保存,冻存效果也更为优异,本身氧化石墨烯具有吸附性强、导热性佳、抑制冰晶形成等多种作用,有利于减少细胞降温过程中的损伤,该新兴的石墨烯材料可通过改性,易于产生光热效应或携带药物,易于通过加快复温速度减少复苏过程中的细胞损伤,将其引入冻存剂中提高了冻存剂本身的应用性,与传统冻存剂相比,复苏后的细胞在存活率上有明显的提高,因此值得广泛推广进行应用。
本发明的第二目的在于提供上述冻存剂的制备方法,制备方法本身操作简便,前后步骤衔接紧密,操作条件温和,无三废产生,整个操作过程绿色环保。
本发明的第三目的在于提供上述冻存剂的使用方法,使用方法简单,易操作,对环境要求低,适于更为广泛的进行应用。
本发明的第四目的在于提供包含上述冻存剂的冻存液,该冻存液中还包含了用于混悬细胞的细胞混悬剂,这样细胞可以形成均一的分散液,更利于冻存操作的顺利进行。
为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:
本发明提供了一种无血清纳米材料冻存剂,包括DMSO、血清替代物以及氧化石墨烯组成。
目前现有技术中,细胞冻存液中的主要成分有10%二甲基亚砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS)、剩余组分为不完全培养基。培养基以及FBS可为细胞提供必要的营养物质。DMSO是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,从而达到降低细胞损伤的保护效果。但FBS属于动物源性物质,成分比较复杂,在临床应用上存在潜在的风险,也增加了污染的几率,并且由于冻存液中含有动物血清,会导致冻存液的成分存在不稳定的因素,此外细胞冻存后的复温过程多为水浴复温,复温效能低下,复温过程中细胞损伤大。
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