[发明专利]一种利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法

权利要求书

1.一种利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)在恒温恒压条件下，对暴露出中动脉的新鲜离体耳灌流3～5min，灌流液自耳中动脉流入，由耳静脉流出；

2)将经荧光染料标记的血管干细胞加入灌流液中，在恒温恒压条件下，避光循环灌流3～5min后，改用灌流助液循环灌流5～8min，再继续用含有经荧光染料标记的血管干细胞的罐流液循环灌流3～5min，经洗脱、固定后，置于倒置荧光显微镜下观察；

3)结果判断：损伤的中动脉的受损部位观察到荧光，完整的中动脉未观察到荧光；

其中，所述灌流液为含有0.1～0.2mmol/L麦冬多糖的任-洛液，所述灌流助液为含有5～10mmol/L的氯化钾、5～8mmol/L的氯化镁、0.1～0.2mmol/L麦冬多糖和0.5～1.5mmol/L柠檬酸钠的生理盐水。

2.根据权利要求1所述的利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法，其特征在于，所述的血管干细胞为内皮前体细胞，内皮前体细胞粘附于损伤的中动脉的受损部位。

3.根据权利要求1所述的利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法，其特征在于，所述灌流液为含有0.2mmol/L麦冬多糖的任-洛液。

4.根据权利要求1所述的利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法，其特征在于，所述灌流助液为含有5mmol/L的氯化钾、5mmol/L的氯化镁、0.1mmol/L麦冬多糖和1.5mmol/L柠檬酸钠的生理盐水。

5.根据权利要求1所述的利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法，其特征在于，灌流速度为2.0mL/min。

6.根据权利要求1所述的利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法，其特征在于，加入灌流液中的经荧光染料标记的血管干细胞的量为1×10³个细胞/mL灌流液。