[发明专利]一种防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种制备防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的应用，其特征是：

将粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CICC 20419的发酵液经喷雾干燥制成发酵菌粉，即得所述的防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂；所述粪肠球菌(Enterococcus faecalis)CICC 20419，购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心；按每吨饲料使用5kg-10kg防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的配比，投喂生病对虾。

2.根据权利要求1所述的一种制备防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的应用，其特征在于，菌剂的制备方法包括以下步骤：将粪肠球菌依次经摇瓶培养、一级种子培养、二级种子培养和发酵培养后喷雾干燥，制得防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂；具体步骤为：摇瓶培养：将经斜面活化的粪肠球菌菌株进行种子摇瓶培养，培养条件为：转速200-230r/min，温度 32-37℃，培养 10-12 h；一级种子培养：按10%的接种量将粪肠球菌活菌接种于一级种子培养基中，在30℃-37℃培养10-12h，制得一级种子培养液；二级种子培养：按0.06%-0.2%的接种量将一级种子培养液接种于二级种子培养基中，在30℃-38℃培养8-12h，制得二级种子培养液；发酵培养：按3.75%-10%的接种量将二级种子培养液接种于粪肠球菌活菌发酵培养基中，至粪肠球菌数量达到发酵水平时，结束发酵；喷雾干燥：将上述发酵液经喷雾干燥制成发酵菌粉，制得防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂。

3.根据权利要求2所述的一种制备防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的应用，其特征在于，摇瓶培养所用培养基为改良MRS培养基，按质量分数计，具体为：蛋白胨0.5-1.5%、酵母粉0.5-1.0%、无水乙酸钠0.4-0.6%、磷酸氢二钾0.1-0.3%、柠檬酸二铵0.1-0.3%、硫酸镁0.04-0.06%、硫酸锰0.01-0.03%、葡萄糖1-5%，其余为水，调节pH值为6.4-6.8。

4.根据权利要求2所述的一种制备防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的应用，其特征在于，一级种子培养所用培养基按质量分数计，具体为：蛋白胨0.5-1.5%、酵母粉0.5-1.0%、无水乙酸钠0.4-0.6%、磷酸氢二钾0.1-0.3%、柠檬酸二铵0.1-0.3%、硫酸镁0.04-0.06%、硫酸锰0.01-0.03%、葡萄糖1-5%，其余为水，调节pH值为6.4-6.8；在116℃-121℃湿热灭菌20-35min后使用。

5.根据权利要求2所述的一种制备防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的应用，其特征在于，二级种子培养所用培养基按质量分数计，具体为：蛋白胨 0.1-0.5%、酵母浸膏 0.3-0.6%、葡萄糖 0.5-1.5%、蔗糖 0.5-1.5%、K₂HPO₄ 0.3-0.5% 、MnSO₄·H₂O 0.01-0.03% 和MgSO₄·7H₂O 0.04-0.06%，其余为水，pH值 6.6±0.2；在115℃-122℃湿热灭菌20-40min后使用。

6.根据权利要求2所述的一种制备防治凡纳滨对虾白便综合征的菌剂的应用，其特征在于，发酵所用培养基按质量分数计，具体为：蛋白胨 0.1-0.5%、酵母浸膏 0.3-0.6%、葡萄糖 0.5-1.5%、蔗糖 0.5-1.5%、K₂HPO₄ 0.3-0.5% 、MnSO₄·H₂O 0.01-0.03% 和 MgSO₄·7H₂O0.04-0.06%，其余为水，pH值 6.6±0.2；在115℃-122℃湿热灭菌20-40min后使用。