[发明专利]一种防治水产养殖蓝藻水华的复合菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种防治水产养殖蓝藻水华的复合菌剂的应用，特征在于，将复合菌剂加水稀释后，按每亩地1米水深用复合菌制剂200g-350g的施加量均匀的施入池塘中，用于防治水产养殖蓝藻水华；所述复合菌剂包括枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）MES 810的发酵菌粉和解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）MES 812的发酵菌粉，两者的质量比为1:1；所述枯草芽孢杆菌MES 810，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2017年8月10日，保藏编号为CGMCC No.14514；

所述解淀粉芽孢杆菌MES 812，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2017年8月10日，保藏编号为CGMCCNo.14515；

所述枯草芽孢杆菌MES 810的发酵菌粉中的活菌数不少于2.0×10¹⁰cfu/g，解淀粉芽孢杆菌MES 812发酵菌粉中的活菌数不少于4.0×10⁹cfu/g。

2.根据权利要求1所述的防治水产养殖蓝藻水华的复合菌剂的应用，其特征在于，复合菌剂的制备方法为:将制得的枯草芽孢杆菌发酵菌粉和解淀粉芽孢杆菌发酵菌粉按质量比1:1的比例混合均匀，制得所述防治水产养殖蓝藻水华的复合菌剂，得到的复合菌剂中含枯草芽孢杆菌不少于1.0×10¹⁰cfu/g，解淀粉芽孢杆菌不少于2.0×10⁹cfu/g。

3.根据权利要求2所述的防治水产养殖蓝藻水华的复合菌剂的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的发酵菌粉制备方法为，包括以下步骤：①摇瓶培养：将经斜面活化的菌株在摇瓶培养基中进行种子摇瓶培养，摇瓶培养条件为：转速200-230r/min，温度 32-37℃，培养 10-12 h；②一级种子培养：按5%-10%的接种量，取枯草芽孢杆菌活菌冻干管菌种接种于一级种子培养基中，在30℃-37℃培养10-12h，制得一级种子培养液；③二级种子培养：按0.06%-0.2%的接种量将一级种子培养液接种于二级种子培养基中；在30℃-38℃培养8-12h，制得二级种子培养液；④发酵:按3.75%-10%的接种量将二级种子培养液接种于枯草芽孢杆菌活菌发酵培养基中，控制罐压0.02Mpa-0.07Mpa，在30℃-38℃培养24-36h；⑤至芽胞形成率大于等于90%时，结束发酵；⑥将发酵液经喷雾干燥制成枯草芽孢杆菌发酵菌粉。

4.根据权利要求3所述的防治水产养殖蓝藻水华的复合菌剂的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌摇瓶培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，按质量百分数计，具体为：牛肉膏0.5%-3%，蛋白胨0.5%-3%，氯化钠0.2-1%，营养琼脂1.5%-2.0%，其余为水，培养基pH为6.0-7.5；一级种子培养所用培养基，按质量百分数计，具体为：牛肉膏0.5%-3%，蛋白胨0.5%-3%，氯化钠0.2-1%，营养琼脂1.5%-2.0%，其余为水，培养基pH为6.0-7.5；在116℃-121℃湿热灭菌20-35min后使用；二级种子培养所用培养基，按质量百分数计，具体为：葡萄糖0.3%-2%，玉米粉1%-5%，豆粕粉1%-5%，磷酸氢二钠0.1‰-0.5‰，磷酸二氢钠0.5‰-5‰，消泡剂0.2‰-2‰，其余为水，培养基pH调为6.0-7.5；在115℃-122℃湿热灭菌20-40min后使用；发酵所用培养基，按质量百分数计，具体为：葡萄糖0.3%-2%，玉米粉1%-5%，豆粕粉1%-5%，磷酸氢二钠0.1‰-0.5‰，磷酸二氢钠0.5‰-5‰，消泡剂0.2‰-2‰，其余为水，培养基pH调为6.0-7.5；在115℃-122℃湿热灭菌20-40min后使用。