[发明专利]一种三元复合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种三元复合物及其制备方法和应用，所述三元复合物包括聚乙烯亚胺衍生物、蛋白抗原和免疫佐剂。本发明所述三元复合物可以显著提高抗原的交叉提呈反应，且可以降低其毒性，制成疫苗可增加疫苗的生物安全性；可以增强共刺激分子的表达，加强了复合物的免疫刺激效果；复合物粒径均一，重现性好，粒径在100～800nm之间，PdI均小于0.3；具有良好的治疗效果。

技术领域

本发明涉及疫苗制剂领域，特别是涉及一种三元复合物及其制备方法和应用。

背景技术

治疗性疫苗在机体感染病原微生物或者已经患有某种疾病时，能打破机体的免疫耐受，通过诱导特异性的免疫应答，达到治愈的目的。其机理是通过改善和增强对疫苗靶抗原的摄入、表达、处理、呈递和激活免疫应答，从根本上重新激活机体对靶标抗原的免疫应答能力。它能在已患病个体上诱导特异性免疫应答，清除病原体或异常细胞，使疾病得以治愈。作为一种新兴的治疗性疫苗，在肿瘤治疗方面有着广阔的发展前景。

但是，诱导产生的免疫反应是以抗体反应为主的体液免疫反应，而能够对肿瘤细胞起到杀伤作用的免疫反应是抗原特异性激活的细胞毒性T淋巴细胞免疫反应，导致蛋白抗原为基础的肿瘤疫苗疗效有限。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种三元复合物及其制备方法和应用，用于解决现有技术中疫苗的抗肿瘤效果不佳的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供第一方面提供一种三元复合物，所述三元复合物包括聚乙烯亚胺衍生物、蛋白抗原和免疫佐剂。

进一步的，所述聚乙烯亚胺衍生物为聚乙二醇(PEG)修饰的聚乙烯亚胺(PEI)。

进一步的，所述PEG修饰的PEI，修饰比例为：PEG：PEI为3:1。

进一步的，所述蛋白抗原为带负电性的蛋白质。

可选的，所述蛋白抗原为肿瘤抗原蛋白或病毒抗原蛋白。

进一步的，所述免疫佐剂为核酸类佐剂。

在一种实施方式中，所述核酸类佐剂为TLR9配体CpG或TLR3激动剂Poly(I:C)。

所述三元复合物中，所述聚乙烯亚胺衍生物和蛋白抗原的质量比例范围是(0.08～0.4):1。

所述三元复合物中，免疫佐剂和蛋白抗原的质量比范围为(0.1-0.3):1。

本发明第二方面，提供一种三元复合物的制备方法，至少包括以下步骤：

(1)将蛋白抗原溶解配制成蛋白溶液；

(2)将免疫佐剂溶解配制成佐剂溶液；

(3)将步骤(1)中的蛋白溶液和佐剂溶液混合均匀，形成混合物；

(4)将聚乙烯亚胺衍生物溶解配制成载体溶液；

(5)将步骤(3)中的混合物和步骤(4)中的载体溶液混合，得到三元复合物。

进一步的，步骤(1)中，所述蛋白抗原为带负电性的蛋白质。

可选的，步骤(1)中，所述蛋白为肿瘤抗原蛋白或病毒抗原蛋白。

在一种实施方式中，步骤(1)中，采用缓冲溶液进行溶解。所述缓冲溶液选自pH为7.4的PBS或HEPES溶液。

步骤(1)中，所述蛋白溶液的浓度范围是1mg/ml～10mg/ml。

进一步的，步骤(2)中，所述免疫佐剂为核酸类佐剂。

在一种实施方式中，步骤(2)中，所述核酸类佐剂为TLR9配体CpG或TLR3激动剂Poly(I:C)。