[发明专利]具有磷脂酶C活性的多肽及其用途

说明书

本申请提供了具有磷脂酶C活性的多肽，该多肽具有1)包含在一个或多个位置发生氨基酸取代的SEQ ID No:2所示的氨基酸序列，其中所述一个或多个位置选自SEQ ID No:2所示的氨基酸序列中第6位、第8位、第10位、第104位、第205位或其任意组合；或2)与1)至少80％序列同一性，且第6位、第8位、第10位、第104位、第205位的至少1个位置与SEQ ID No:2所示的氨基酸序列中第6位、第8位、第10位、第104位、第205位不同。本申请还提供了编码所述多肽的核酸分子、包含所述核酸分子的载体以及包含所述核酸分子或载体的细胞。本申请还提供了所述多肽、核酸分子载体以及细胞的用途。

技术领域

本申请提供了具有磷脂酶C活性的多肽及其用途。

背景技术

脱胶是油脂精炼的重要步骤，传统的水化脱胶法经济成本高，物料能耗大，环境污染重，所以近些年来，很多工作致力于将酶法脱胶用于油脂精炼中的脱胶环节。同传统方法相比，酶法脱胶能够提高经济效益，实现节能减排，对生态环境污染少，在环保、经济、质量等方面具有较大的优势。油脂脱胶中所用的一种酶为磷脂酶。同其他脱胶酶相比，磷脂酶C(PLC)表现出更大的优势，例如，增加甘二酯(DAG)的得率，以及减少得油量的损失。

蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)的磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(BC-PC-PLC)是研究较早的一种磷脂酶C。BC-PC-PLC全长为283个氨基酸，其中包含24个氨基酸的信号肽和14个氨基酸的前导肽，成熟肽为245个氨基酸(参见，例如Johansen,T.,Holm,T.,Guddal,P.H.,Sletten,K.,Haugli,F.B.,Little,C.(1988).Cloning and sequencing of thegene encoding the phosphatidylcholine-preferring phospholipase C of Bacilluscereus.Gene 65(2):293-304)。

先前有文献报道，野生型BC-PC-PLC的活性位点为Glu4、Asp55、Tyr56、Glu146、Ser64、Thr65、Phe66、Phe70、Ile80、Thr133、Asn134、Leu135、Ser143(参见，例如Hough.,E.,Hansen,L.K.,Birknes,B.,Jynge,K.,Hansen,S.,Hordvik,A.,Little,C.,Dodson,E.,Derewenda,Z.(1989)High-resolution(1.5A)crystal structure of phospholipase Cfrom Bacillus cereus.Nature.338:357-60)。