[发明专利]一种动物体内药物残留的检测方法

说明书

本发明提供的一种动物体内药物残留的检测方法，该方法以动物尿液作为检测对象，利用提取液进行待检测样品的提取，并将提取后获得的上清液经Prime HLB固相萃取柱净化，以完成样品前处理，然后应用超高效液相色谱‑串联四极杆线性离子阱质谱仪，建立了动物尿液中85种药物同时筛查、确证的检测方法，该检测方法具有操作简单、通量高效、定性准确、灵敏度高等特点，适合用于动物尿液中多种药物的筛查、确证，可极大的提高检测效率，避免假阳性样品的检出。

技术领域

本发明公开涉及药物检测的技术领域，尤其涉及一种动物体内药物残留的检测方法。

背景技术

随着我国畜牧业的繁荣和发展，药物(包括药物添加剂)的使用日益广泛。药物不仅可用于治疗和预防动物疾病，还可以促进动物的生长繁殖和提高生产性能，提高畜禽的经济价值，保障畜牧业的发展。出于治疗及预防的目的，药物被应用于现代畜禽养殖的一些环节中，但是药物的不合理应用及不遵守正确的休药期导致药物及其代谢产物在动物体内滞留或蓄积，并以残留的方式进入人体，危害人类健康。

如何进行药物残留的有效监控己经成为国际社会关注的焦点问题。目前，在进行动物性产品中药物残留的检测方法，大多以动物可食组织作为检测对象，但由于动物可食组织基质复杂，导致样品前处理方法操作繁琐，耗时较长，试剂需要量大，回收率低，现有的检测方法多为检测一类或几类药物，存在检测效率低的问题。

因此，如何研发一种新的检测方法，以解决上述问题，成为人们亟待解决的问题。

发明内容

鉴于此，本发明提供了一种动物体内药物残留的检测方法，以至少解决现有检测方法以动物可食组织作为检测对象，存在样品前处理方法操作繁琐，耗时较长，试剂需要量大，回收率低等问题，而且现有的检测方法多为检测一类或几类药物，存在检测效率低的问题。

本发明提供的技术方案，具体为，一种动物体内药物残留的检测方法，该方法以动物尿液作为检测对象，具体包括如下步骤：

1)样品前处理：

量取样品放置于塑料离心管中，加入提取液后，涡旋振荡、离心，收集上清液；

将所述上清液过Prime HLB固相萃取柱净化、浓缩、定容后，备用；

2)定性分析：

运用UPLC-MS/MS-Qtrap法对经过样品前处理的待检测动物尿液样品进行筛查，采用液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪的增强子离子扫描功能，建立MRM-IDA-EPI筛查方法，获得待检测动物尿液样品中各目标药物母离子的MS²谱图；

用已知数据库中各药物的标准MS²谱图与获得待检测动物尿液样品中各目标药物母离子的MS²谱图分别进行对比，获得相似度值，并匹配两者的特征碎片离子，进而判断待检测动物尿液样品中是否含有目标药物；

3)定量分析：

分别称取各药物标准品，依据相似相溶原理选择溶剂分别配制1mg/mL的标准储备液，备用；

按照步骤1)中样品前处理方法对空白样品进行处理后，用空白样品基质溶液稀释标准储备液，制成混合标准储备溶液；

将混合标准储备溶液定容后，配制浓度为0.5ng/mL～100ng/mL的系列基质匹配标准工作溶液。

运用UPLC-MS/MS-Qtrap法，采用液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪对系列匹配标准工作溶液和经过样品前处理的待检测动物尿液样品分别进行测定，获得以浓度为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标的绘制标准曲线，以此标准曲线来计算待检测动物尿液样品中目标药物的残留量。

优选，所述提取液为含有甲酸的乙腈与甲醇的混合溶液，其中，乙腈与甲醇的体积比为1:1，且甲酸的体积浓度为0.2％。