[发明专利]一种白掌叶片组织培养方法有效
| 申请号： | 201811632815.6 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109526747B | 公开（公告）日： | 2022-07-05 |
| 发明（设计）人： | 吴高殷;王晓;邹薇薇;魏春芳 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 胡绪东 |
| 地址： | 550025 贵州省贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 叶片 组织培养 方法 | ||
1.一种白掌叶片组织培养方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
（1）于早7点至早9点选取生长茂盛，无病虫害母株，从中挑选幼嫩叶片；
（2）清洗消毒：用棉球或者毛笔清洗掉叶片表面和背面的杂质，并进行清洗消毒；清洗消毒：加入4滴洗洁精清洗叶片再在自来水下冲洗半小时；首先用75%酒精处理30s，无菌水清洗两遍，其次0.1%HgCl2处理6min，无菌水清洗4遍；
（3）幼嫩叶片丛生芽诱导：将叶片切成1cm×1cm的正方形，然后再用刀片在叶片上划两刀，最后接种至丛生芽诱导培养基中，培养基为MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，培养条件为暗培养，温度为25±2℃；（4）丛生芽的增殖诱导：在原培养基中继代1-2次后，转移至增殖培养基中进行丛生芽的增殖培养，增殖培养基为MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，培养条件为光培养，光照强度2000lux，16h/d，温度为25±2℃； （5）丛生芽的生根诱导：待丛生芽长势良好，叶片翠绿，芽高长至2cm以上时，切下丛生芽进行生根诱导，生根诱导培养基为1/2MS +0.1-1mg/L NAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，培养条件为光培养，光照强度2000lux，16h/d，温度为25±2℃；
（6）水培炼苗：将生根苗从瓶内移出，在自来水下清洗掉根上的培养基，轻拿轻放，不要伤根，将生根苗插入支持物为打孔的泡沫纸和穴盘中，加入设定量经过处理的自来水使支持物漂浮在水面上，前期均对试管苗进行遮阴覆盖，每隔3d逐渐降低膜的覆盖面积。
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