[发明专利]一种白掌叶片组织培养方法

说明书

本发明公开了一种白掌叶片组织培养方法，该方法为：通过消毒清洗、幼嫩叶片丛生芽诱导、丛生芽的增殖诱导、丛生芽的生根诱导、水培炼苗获得白鹤芋试管苗，本发明能够获得培育性状稳定、生长一致的白掌试管苗，选取生长旺盛的试管苗进行水培驯苗，试管苗成活率达100%且长势良好，为工厂化生产节约成本提供技术支撑。

技术领域

本发明涉及一种白掌叶片组织培养方法，属于白掌叶片组织培养技术领域。

背景技术

白掌(学名：Spathiphyllum kochii Engl.K.Krause)天南星科多年生草本植物。叶片呈披针形，叶脉较明显且叶色深绿令人赏心悦目；佛焰苞大，高出叶片花序白色或乳白色，具有较高的观赏价值，是室内较好的盆栽花卉还可净化室内空气。以往白掌以分株作为常规繁殖方式，近些年来因植物生物技术的快速发展，植物组织培养广泛应用到植物上，甚至很多种类的植物投入到工厂化生产，例如兰科植物中的蝴蝶兰和多肉植物中玉露等。但并未记载对白鹤芋花序的培养技术。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种白掌叶片组织培养方法，以解决上述现有技术中存在的问题。

本发明采取的技术方案为：一种白掌叶片组织培养方法，该方法包括以下步骤：

(1)于早7点至早9点选取生长茂盛，无病虫害母株从中挑选幼嫩叶片；

(2)清洗消毒：用棉球或者毛笔清洗掉叶片表面和背面的杂质，并进行清洗消毒；

(3)幼嫩叶片丛生芽诱导：将叶片切成1cm×1cm左右的正方形，然后再用刀片在叶片上划两刀增加伤口与培养基的接触面积，最后接种至培养基中，以MS为基本培养基，培养基中添加分裂素6-BA、2,4-D、蔗糖和琼脂，培养条件为暗培养，温度为25±2℃；

(4)丛生芽的增殖诱导：在原培养基中继代1-2次后，转移至增殖培养基中进行丛生芽的增殖培养，以MS为基本培养基，增殖培养基中添加6-BA、NAA、蔗糖和琼脂，培养条件为光培养，光照强度2000lux，16h/d，温度为25±2℃；

(5)丛生芽的生根诱导：待丛生芽长势良好，叶片翠绿，芽高长至2cm以上时，切下(那部分)进行生根诱导，1/2MS培养基作为生根基本培养基，培养基中添加NAA、蔗糖和琼脂，培养条件为光培养，光照强度2000lux，16h/d，温度为25±2℃；

(6)水培炼苗：将生根苗从瓶内移出，在自来水下清洗掉根上的培养基，轻拿轻放，不要伤根，将生根苗插入支持物为打孔的泡沫纸和穴盘中，加入设定量经过处理的自来水使支持物漂浮在水面上，前期均对试管苗进行遮阴覆盖保证其具有高的空气湿度，防止叶片干枯，每隔3d逐渐降低膜的覆盖面积。

优选的，上述步骤(2)中清洗消毒：加入4滴洗洁精冲洗清洗叶片再在自来水下冲洗半小时；首先用75％酒精处理30s，无菌水清洗两遍，其次0.1％HgCl₂处理6min，无菌水清洗4遍。

优选的，上述步骤(3)中6-BA、2,4-D、琼脂和蔗糖的量分别为3mg/L、0.1mg/L、6g/L和30g/L。

优选的，上述步骤(4)中6-BA、NAA、琼脂和蔗糖的量分别为3mg/L、0.1mg/L、6g/L和30g/L。

优选的，上述步骤(5)中6-BA、NAA、琼脂和蔗糖的量分别为3mg/L、0.1-1mg/L、6g/L和30g/L。