[发明专利]一种基于肥胖相关基因检测方法在审
申请号: | 201811633218.5 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN111378737A | 公开(公告)日: | 2020-07-07 |
发明(设计)人: | 孟小雨;陈忠伟;朱玉华;张立伟;朱玉梅 | 申请(专利权)人: | 大美基因科技(广东)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 511458 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 肥胖 相关 基因 检测 方法 | ||
1.一种基于肥胖相关基因检测方法,其特征在于,具体步骤如下:
1)首先采集检测样品,具体用无菌棉棒在测试者口腔内部左右腮两侧刮擦,采集到足够的样本细胞;
2)然后提取测试者基因组DNA;
3)荧光定量PCR进行SNP检测,每个样品设立2个定量PCR检测管,分别加入Fw+R、Fm+R引物对用于检测正常和突变的等位基因;反应在ABI Prism7900荧光定量PCR仪上进行;
4)最后对身体数据测量,身体数据为体重指数、体脂率、运动心肺功能测量、腰臀比率。
2.根据权利要求1所述的一种基于肥胖相关基因检测的方法,其特征在于,所述的基因组DNA提取包括如下步骤:
(1) 取1.5ml离心管,加入1ml裂解液;
(2) 将取样棉签放入裂解液中洗脱;
(3) 加入20mg/ml蛋白酶K 2.5μl,混匀,56℃水浴2h;
(4) 取新的1.5ml EP管加入300μl酚,300μl氯仿/异戊醇;
(5) 取800μl上述裂解反应液放入步骤(4)试剂中颠倒混匀,7500g离心15min;
(6) 取上清液,加入30μl 5M NaCl和700μl氯仿/异戊醇,颠倒混匀,7500g离心15min;
(7) 取上清,加入0.6倍体积异戊醇,1200g离心15min,弃上清;
(8) 70%冷乙醇洗涤沉淀,7500g离心15min,弃上清,干燥,加入15μl水溶解,浓度定量。
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