[发明专利]一种测定花生干种子中反式白藜芦醇含量的方法在审
| 申请号： | 201811636779.0 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109709226A | 公开（公告）日： | 2019-05-03 |
| 发明（设计）人： | 徐思亮;罗怀勇;陈海文;喻博伦;郭建斌;陈伟刚;赵姣姣 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院油料作物研究所 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王莹;吴欢燕 |
| 地址： | 430062 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 干种子 花生 反式白藜芦醇 粗提液 酶解液 高效液相色谱测定 取上清液 纤维素酶 灵敏度 前处理 溶剂 乙醇 超声 混匀 酶解 参考 优化 分析 | ||
1.一种测定花生干种子中反式白藜芦醇含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
将花生干种子粉末置于酶解液中，酶解，再加入乙醇，混匀后，在频率为30～60kHz下超声10min～4h，离心取上清液，得花生干种子粗提液；所述酶解液为纤维素酶的水溶液，浓度为1～8g/L；
使用高效液相色谱测定所述花生干种子粗提液中反式白藜芦醇的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶解液的浓度为1～8g/L，优选为2～4g/L。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述酶解的时间为1～3h，进一步优选为2h。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述超声的时间为10min～1h。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述花生干种子粉末与所述酶解液的质量体积比为(2～4):5，优选为3:5。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述酶解液与所述乙醇的体积比为5:(10～16)，优选为5:12。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将所述花生干种子粗提液经中性氧化铝处理后再使用高效液相色谱测定其中反式白藜芦醇的含量。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将所述花生粗提液进行浓缩蒸干，加甲醇复溶，加入中性氧化铝混匀，离心取上清液，过滤膜得待测品，使用高效液相色谱测定所述待测品中反式白藜芦醇的含量。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述花生粗提液与所述甲醇的体积为(10～15):1；
和/或，所述花生粗提液与所述氧化铝的体积质量比为(20～40):1，优选为(25～30):1。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于，“使用高效液相色谱测定所述花生干种子粗提液中反式白藜芦醇的含量”具体为：使用外标法建立反式白藜芦醇的甲醇溶液的高效液相色谱中的峰面积与浓度的标准曲线，根据所述标准曲线和所述花生干种子粗提液中反式白藜芦醇的峰面积，得到所述花生干种子粗提液中反式白藜芦醇的浓度值。
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