[发明专利]CD7嵌合抗原受体修饰的NK-92MI细胞及其应用

权利要求书

1.一种工程化的NK细胞，其特征在于，所述的NK细胞表达嵌合抗原受体CAR，所述CAR的抗原结合结构域含有靶向CD7的纳米抗体VHH序列；所述抗原结合结构域含有n个靶向CD7的纳米抗体VHH序列，其中n为2；所述靶向CD7的纳米抗体VHH序列如SEQ ID NO.: 1所示；

所述CAR的结构如下式I所示：

L-S-H-TM-C-CD3ζ (I)

式中，各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

S为抗原结合结构域；

H为任选的绞链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列。

2.如权利要求1所述的NK细胞，其特征在于，所述抗原结合结构域的结构为V_HH-I-V_HH，其中所述V_HH为靶向CD7的纳米抗体VHH序列，I为无或连接肽La。

3. 如权利要求1所述的NK细胞，其特征在于，所述抗原结合结构域包括如SEQ ID NO.:2所示的序列。

4. 如权利要求2所述的NK细胞，其特征在于，所述连接肽La的序列如SEQ ID NO.: 5所示。

5. 如权利要求1所述的NK细胞，其特征在于，所述CAR具有如SEQ ID NO.: 4所示的氨基酸序列。

6.如权利要求1所述的NK细胞，其特征在于，NK细胞是自体或异体的。

7.如权利要求1所述的NK细胞，其特征在于，NK细胞为NK92细胞。

8. 一种嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述CAR的抗原结合结构域含有靶向CD7的纳米抗体VHH序列，其中，所述抗原结合结构域的序列如SEQ ID NO.: 2所示。

9.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求8所述的嵌合抗原受体CAR。

10.一种载体，其特征在于，所述的载体含有如权利要求9所述的核酸分子。

11. 如权利要求10所述的载体，其特征在于，所述的载体选自下组：慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、或其组合。

12. 一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞表达权利要求8所述的嵌合抗原受体CAR；和/或

所述宿主细胞基因组中整合有外源的权利要求9所述的核酸分子；和/或

所述宿主细胞含有权利要求10所述的载体。

13.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求1所述的工程化的NK细胞、或权利要求9所述的核酸分子、或权利要求10所述的载体，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

14.如权利要求1所述的工程化的NK细胞、如权利要求8所述的嵌合抗原受体CAR、如权利要求9所述的核酸分子、或如权利要求10所述的载体的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。

15.一种制备如权利要求1所述的工程化的NK细胞的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：将如权利要求9所述的核酸分子或如权利要求10所述的载体转导入NK细胞内，从而获得所述工程化的NK细胞。