[发明专利]CD7嵌合抗原受体修饰的NK-92MI细胞及其应用

说明书

本发明提供了CD7嵌合抗原受体修饰的NK‑92MI细胞及其应用。具体地，本发明提供了一种工程化的NK细胞，所述的NK细胞表达嵌合抗原受体CAR，所述CAR的抗原结合结构域含有靶向CD7的纳米抗体VHH序列。本发明的NK细胞能够有效地杀伤肿瘤细胞，尤其是T细胞肿瘤，对T细胞白血病(如T‑ALL)的治疗效果非常好。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地，本发明涉及CD7嵌合抗原受体修饰的NK-92MI细胞及其应用。

背景技术

T细胞恶性肿瘤代表一种类型的血液系统癌症，在儿童和成人的复发率和死亡率都很高，目前尚无有效或靶向治疗方法。T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)是一种高度异质性的血液系统恶性肿瘤，占成人急性淋巴细胞白血病病例的25％和小儿急性淋巴细胞白血病病例的15％。目前，T-ALL的治疗策略包括强化化疗，异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)，抗病毒治疗和分子靶向治疗。但是，强化化疗和allo-HSCT通常不能预防治疗难治性复发。对于那些在初始治疗后复发的患者，补救性化疗方案的缓解率大约是20-40％。虽然造血干细胞移植是唯一可以治愈的方案，但是会伴有死亡风险。

近年来，嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗已显示出非常有效的治疗效果，作为一种强大的新型过继免疫治疗技术，被用于治疗多种实体和血液癌症，最显著的是对于B细胞淋巴细胞白血病和淋巴瘤的治疗。CAR-T疗法利用经修饰的患者T淋巴细胞以主要组织相容性复合物非依赖性方式靶向和消除恶性肿瘤。有效应用该技术的关键是选择一个合适的CAR靶点。最佳的靶抗原应该只在肿瘤细胞表达，不在正常细胞表达，或者表达在那种正常细胞短暂缺失后，临床上有应对方案的细胞上。因此，B细胞来源的白血病和淋巴瘤可以用针对CD19或CD22的CAR靶向治疗，这是因为CD19和CD22仅由B淋巴样细胞表达。将表达抗CD19-CAR的自体T细胞输注到患有难治性B细胞白血病和淋巴瘤的患者中中会导致显著的临床反应。这些结果提供了无可争议的证据支持这项技术在临床应用中的巨大潜力。

但是，设计针对T细胞肿瘤的CAR仍然面临着很大的挑战，这是因为在正常T细胞和T细胞恶性肿瘤上会表达相同的抗原，导致CAR-T细胞自相残杀。

因此，本领域迫切需要开发能有效治疗T细胞肿瘤的药物和方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种能有效治疗T细胞肿瘤的药物和方法。

本发明的另一目的是提供一种CD7嵌合抗原受体修饰的NK-92MI细胞及其应用。

本发明的第一方面，提供了一种工程化的NK细胞，所述的NK细胞表达嵌合抗原受体CAR，所述CAR的抗原结合结构域含有靶向CD7的纳米抗体VHH序列。

在另一优选例中，所述抗原结合结构域含有n个靶向CD7的纳米抗体VHH序列，其中n为1-5的正整数，较佳地，n为1-3的正整数，更佳地，n为1或2。

在另一优选例中，当n≥2时，所述抗原结合结构域还含有各靶向CD7的纳米抗体VHH序列之间的连接肽La。

在另一优选例中，所述连接肽La的长度为5-25，较佳地10-20个氨基酸。

在另一优选例中，所述抗原结合结构域的结构为V_HH或V_HH-I-V_HH，其中所述V_HH为靶向CD7的纳米抗体VHH序列，I为无或连接肽La。

在另一优选例中，所述抗原结合结构域为1个或2个靶向CD7的纳米抗体VHH序列。

在另一优选例中，所述靶向CD7的纳米抗体VHH序列如SEQ ID NO.:1所示。

在另一优选例中，所述V_HH-I-V_HH的序列如SEQ ID NO.:2所示。