[发明专利]用于检测人乳头瘤病毒的核酸试剂、试剂盒、系统及方法

说明书

本公开涉及一种用于检测人乳头瘤病毒的核酸试剂、试剂盒、系统及方法其中，所述核酸试剂包括分别彼此独立存放或互相任意混合存放的SEQ ID NO.1～50所示的引物和SEQ ID NO.53～77所示的探针。本公开通过以上所述的引物和探针建立了检测人乳头瘤病毒的核酸试剂、试剂盒、系统及方法，能够实现快速、全面、敏感、特异、自动的检测结果判定。

技术领域

本公开涉及生物技术领域，具体地，涉及一种用于检测人乳头瘤病毒的核酸试剂、试剂盒、系统及方法。

背景技术

随着筛查的普及，宫颈癌在发达国家或地区的发生率和死亡率已显著下降，一些发达国家如英国和澳大利亚从1991年到2000年宫颈癌发病率减少33％。由于欠发达地区筛查未开展或不规范在世界范围内，因此宫颈癌是女性第二大常见的恶性肿瘤，死亡率仍保持较高的水平。宫颈癌病因明确，大量的研究表明高危型人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)持续感染是宫颈癌及癌前病变的主要致病因素。

HPV属于乳多空病毒科(Papovavirdae)乳头瘤病毒属，HPV主要通过直接或间接接触污染物品或性传播感染人类。HPV不但具有宿主特异性，而且具有组织特异性，只能感染人的皮肤和粘膜上皮细胞，引起人类皮肤的多种乳头状瘤或疣以及粘膜生殖道上皮增生性损伤。持续HPV感染是导致宫颈癌和一些生殖器瘤样病变的主要原因。

HPV是呈球形、无包膜的双链DNA病毒。核壳呈对称20面体，由72个壳粒组成，壳粒由L1、L2两种衣壳蛋白组成。HPV基因组长8000bp，编码8个主要开放读码框架(OpenReading Frames，ORF)，分为3个功能区，即早期转录区(E区)，晚期转录区(L区)与长控制区(Long Control Region，LCR)。E区编码E1、E2、E4、E5、E6、E7等早期蛋白，参与病毒的复制、转录、翻译调控和转化等功能；L区编码主要衣壳蛋白和次要衣壳蛋白。L1约占衣壳蛋白的80％，高度保守，L2含量较少，变异较多。LCR含有HPV基因组DNA的复制起点和HPV表达所需的调控元件，调控病毒的转录与复制。

目前已有HPV基因型别100余个，近33％的基因型与生殖道损伤有关。感染生殖道的可分为两种：低危型(Low Risk，LR)和高危型(High Risk，HR)。其中HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68是常见的HPV高危型感染，与宫颈癌有密切联系；而HPV 6和11则为HPV低危型。HPV 16和18在HPV高危型中最为常见，研宄表明全世界有70％的宫颈癌与HPV 16和18感染有关。而HPV 6和11与大多数的生殖器瘤样病变有关。HPV基因分型对临床有重要意义。持续HPV高危型感染可进展为宫颈癌，一些研究表明，不同的高危型HPV基因型有不同的致癌风险。根据年美国阴道镜和宫颈病理协会(American Society forColposcopy and Cervical Pathology，ASCCP)关于宫颈癌筛查的管理指南，HPV 16和18感染的妇女筛查的策略不同于其它高危型HPV感染，HPV16和18感染的30岁以上妇女，应直接行阴道镜检查，而其它高危型阳性，可间隔12个月后重复细胞学和HPV检测，检测再次阳性的才进行阴道镜检查。另外，HPV疫苗用于预防宫颈癌，目前己上市的有Merk公司生产的四价疫苗、葛兰素史克公司的二价疫苗Cervarix。在疫苗接种前和接种后均需进行HPV基因分型检测。HPV基因分型对于HPV疫苗使用监测也具有重要价值。