[发明专利]免疫捕获组合物、制备方法、试剂盒以及应用

权利要求书

1.一种免疫捕获组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

步骤（1）：提供一固相载体，将第一配体直接固定于所述固相载体表面，以得到包被有所述第一配体的所述固相载体；所述固相载体为表面羧基化磁珠，直径为6μm；所述第一配体为氮末端脑钠肽捕获抗体；

步骤（2）：加入0.5mL第三封闭化合物溶液，所述第三封闭化合物溶液为5%乙醇胺、10mMPBS缓冲溶液、pH7.4，室温封闭0.5个小时；

步骤（3）：加入0.5mL第一封闭化合物溶液，所述第一封闭化合物溶液为5%海藻糖溶解于10mMPBS缓冲溶液、pH7.4，室温封闭2小时；

步骤（4）：加入0.5mL第二封闭化合物溶液，所述第二封闭化合物溶液为1%牛血清白蛋白溶解于10mMPBS缓冲溶液、pH7.4，室温封闭1小时；

步骤（5）：封闭完成后，磁分离清洗两次；

步骤（6）：加入PBS-TBN缓冲液，所述PBS-TBN缓冲液为10mM PBS、0.05% Tween 20、0.1%BSA、pH7.4，磁珠浓度为0.2mg/mL ，2-8℃避光保存。

2.一种免疫捕获组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

步骤（1）：提供一固相载体，将第一配体直接固定于所述固相载体表面，以得到包被有所述第一配体的所述固相载体；所述固相载体为表面甲苯磺酰基化磁珠，直径为1μm；所述第一配体为甲胎蛋白捕获抗体；

步骤（2）：加入0.5mL第三封闭化合物溶液，所述第三封闭化合物溶液为10 mM甘氨酸、pH8.3，室温封闭0.5个小时；

步骤（3）：加入0.5mL第二封闭化合物溶液，所述第二封闭化合物溶液为10%甘露醇溶解于10mMPBS缓冲溶液、pH7.4，室温封闭4个小时；

步骤（4）：加入0.5mL第一封闭化合物溶液，所述第一封闭化合物溶液为1%酪蛋白溶解于10mMPBS缓冲溶液、pH7.4室温封闭4小时；

步骤（5）：封闭完成后，磁分离清洗两次；

步骤（6）：加入PBS-TBN缓冲液，所述PBS-TBN缓冲液为10mM PBS、0.05% Tween 20、0.1%牛血清白蛋白、pH7.4，磁珠浓度为0.5mg/mL，2-8℃避光保存。

3.一种免疫捕获组合物，其特征在于，所述免疫捕获组合物通过权利要求1或2所述的制备方法获得。

4.一种免疫检测试剂盒，其特征在于，所述免疫检测试剂盒包括：

如权利要求1-3任一项所述的免疫捕获组合物；

以及免疫检测组合物，所述免疫检测组合物包括至少一个第二配体和信号示踪物；

所述信号示踪物为酶示踪物、化学发光示踪物、或荧光示踪物中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述免疫检测试剂盒进一步包括：

至少一个试剂管，所述试剂管内设有悬浮液；

所述免疫捕获组合物以及免疫检测组合物溶于所述悬浮液内；

其中，所述悬浮液包括缓冲液、表面活性剂、无机盐、稳定剂以及防腐剂。

6.一种免疫检测方法，所述免疫检测方法基于权利要求4或5所述的免疫检测试剂盒，其特征在于，所述免疫检测方法包括：

提供权利要求4或5所述的免疫捕获组合物；

向检测体系中加入待测样本和所述免疫捕获组合物；

向所述检测体系中加入至少一个免疫检测组合物；

孵育，磁分离；

检测所述免疫检测组合物的荧光信号。

7.一种免疫荧光分析系统，其特征在于，包括：

如权利要求4或5所述的免疫检测试剂盒；

以及用以检测所述免疫检测试剂盒的荧光信号的光学检测机构。