[发明专利]一种用于检测KRAS基因突变的核苷酸序列组及其应用在审
| 申请号： | 201811645155.5 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN111378751A | 公开（公告）日： | 2020-07-07 |
| 发明（设计）人： | 李超群;王永成;王旭;谭英绮 | 申请（专利权）人： | 成都华青精准医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 610041 四川省成都市*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 kras 基因突变 核苷酸 序列 及其 应用 | ||
1.一种核苷酸序列组，其特征在于，所述核苷酸序列组包括正向引物和反向引物，用于扩增含有突变型KRAS基因的一部分；所述正向引物的3’末端对应突变型KRAS基因正义链中突变位点、突变位点向正义链5’端10个碱基以及突变位点向正义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置；或者反向引物的3’末端对应突变型KRAS基因反义链中突变位点、突变位点向反义链5’端10个碱基以及突变位点向反义链3’端10个碱基中任何一个碱基的位置。
2.如权利要求1所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述核苷酸序列组还包括阻断核苷酸序列，所述阻断核苷酸序列对应于所述突变位点处的一段野生型KRAS基因，能减少或阻止所述正向引物或所述反向引物对野生型KRAS基因的扩增。
3.如权利要求2所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述正向引物或所述反向引物上包括人为突变位点，所述人为突变位点使得所述正向引物与突变型KRAS基因的反义链不能完全互补；或者所述人为突变位点使得所述反向引物与突变型KRAS基因的正义链不能完全互补。
4.如权利要求3所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述人为突变位点位于距正向引物3’端1-10个碱基中任何一个的位置；或者所述人为突变位点位于距反向引物3’端1-10个碱基中任何一个的位置。
5.如权利要求1所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述正向引物或所述反向引物上包括人为突变位点，所述人为突变位点使得所述正向引物与突变型KRAS基因的反义链不能完全互补；或者所述人为突变位点使得所述反向引物与突变型KRAS基因的正义链不能完全互补。
6.如权利要求5所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述人为突变位点位于距正向引物3’端1-10个碱基中任何一个的位置；或者所述人为突变位点位于距反向引物3’端1-10个碱基中任何一个的位置。。
7.如权利要求4所述的核苷酸序列组，其特征在于，所述阻断核苷酸序列的3’端添加有2-5个相对于野生型KRAS基因的非互补碱基，或者添加有使阻断核苷酸序列本身不能延伸的3’端化学修饰。
8.一种核苷酸序列组，其特征在于，所述核苷酸序列组包括正向引物和反向引物，用于扩增含有突变位点的KRAS基因的一部分；所述正向引物的序列选自如SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2和SEQ ID NO:3所示的序列中的一个或多个。
9.一种试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1-8中任一项所述的核苷酸序列组。
10.一种检测基因突变的方法，其特征在于，使用如权利要求1-8中任一项所述的核苷酸序列组进行PCR扩增。
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