[发明专利]一种硒化海藻酸钠与硒化壳聚糖包覆的益生菌双层微胶囊、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种双层微胶囊，包括硒化海藻酸钠、硒化壳聚糖和益生菌；

所述双层微胶囊的制备方法，包括以下步骤：

1)将亚硒酸钠在pH为1～2的条件下缓慢加入到海藻酸钠，过滤取滤液，加乙醇醇析，抽滤烘干得硒化海藻酸钠；

2)将亚硒酸钠在pH为1～2的条件下缓慢加入到壳聚糖，过滤取滤液，加乙醇醇析，抽滤烘干得硒化壳聚糖；

3)将硒化海藻酸钠和硒化壳聚糖灭菌并充氮除氧，制得无菌硒化海藻酸钠以及无菌硒化壳聚糖；

4)将益生菌用PBS缓冲液重悬、离心、取菌体；再用PBS缓冲液重悬得菌悬液；

5)将步骤4)制得的菌悬液与步骤3)的无菌硒化海藻酸钠按体积比为1：(2～10)混合均匀，得海藻酸钠菌悬液；

6)将海藻酸钠菌悬液与步骤3)的无菌硒化壳聚糖溶液按体积比为1：(1～5)混合得到海藻酸钠壳聚糖混合菌悬液；

7)将海藻酸钠壳聚糖混合菌悬液滴到2～5％的无菌氯化钙，静置得包覆益生菌的双层微胶囊；

步骤1)所述的亚硒酸钠与海藻酸钠的质量比为1:10～50；

步骤2)所述的亚硒酸钠与壳聚糖的质量比为1:10～50。

2.根据权利要求1所述的双层微胶囊，其特征在于，步骤1)所述的海藻酸钠分子量为2～40万；步骤2)所述的壳聚糖分子量为1～20万。

3.根据权利要求1所述的双层微胶囊，其特征在于，步骤3)硒化海藻酸钠质量浓度为1～5％，硒化壳聚糖质量浓度为0.5～2％。

4.根据权利要求1所述的双层微胶囊，其特征在于，步骤4)将益生菌先用PBS缓冲液按质量比为1：(3～10)重悬、离心、取菌体；再用PBS缓冲液按体积比为1：(1～2)重悬得菌悬液。

5.根据权利要求1所述的双层微胶囊，其特征在于，步骤4)所述的益生菌为嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、双歧杆菌、短乳杆菌、植物乳杆菌。

6.权利要求1～5任一项所述的双层微胶囊在制备耐胃酸的口服益生菌制剂中的应用。